[发明专利]可降解单宁酸的泛菌B-3及其应用

说明书

本申请公开了一种可降解单宁酸的泛菌B‑3及其应用，旨在解决烟叶加工中单宁酸类物质难以降解及缺乏对烟叶品质处理改善有良好效果的特效微生物的技术问题。本申请从雪茄中分离、筛选得到泛菌B‑3菌株，保藏编号为CCTCC NO：M20221165，其代谢酶产物能够显著降低烟叶中的单宁酸含量，并综合改善烟叶加工品质（如提升烘焙香，降低青杂气和土腥气等不良气息，改善苦味和涩味等吃味）；以泛菌B‑3代谢酶产物处理烟叶的工艺流程简便，处理周期较短，烟叶加工处理成本较低。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种可降解单宁酸的泛菌B-3及其应用。

背景技术

单宁酸是烟株生长过程中产生的一类多酚类物质，其含量的高低事关烟草品质的优劣；烟叶中过高含量的单宁酸对烟叶制品抽吸时的品质是很不利的，抽吸时会产生苦涩的感觉。因此，选择利用有效的方法降解烟叶中的单宁酸，使其还原成小分子物质，是提高烟叶品质的有效途径之一。

如何利用生物技术降低烟叶中的单宁酸含量，从而提高烟叶品质，已成为业内科技工作者普遍关注的问题；其中，生物法降解烟叶单宁酸的研究主要有酶制剂法和微生物法，后者以其成本低廉、操作简单等优势成为研究热点。有鉴于此，筛选特异性微生物以应用于烟叶生物发酵处理，对有效降解烟叶中大分子物质、有效改善烟叶制品的品质具有十分重要的现实意义。

公开于该背景技术部分的信息仅用于加深对本公开的背景技术的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成本领域技术人员所公知的现有技术。

发明内容

发明人通过研究发现：从雪茄中分离、筛选得到的泛菌B-3菌株，其代谢酶产物能够降低烟叶中的单宁酸含量，并综合改善烟叶品质（如提升烘焙香，降低青杂气和土腥气等不良气息，改善苦味和涩味等吃味）。

根据本公开的一个方面，筛选得到一种泛菌B-3，其分类命名为 Pantoeasp. B-3，于2022年7月25日保藏于中国典型培养物保藏中心（地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，邮编：430072），其保藏编号为 CCTCC NO：M20221165。

根据本公开的另一个方面，提供一种含有所述泛菌B-3或/和其代谢酶产物的微生物制剂。

根据本公开的另一个方面，将所述泛菌B-3或所述微生物制剂应用于降低烟叶中的单宁酸含量。

根据本公开的另一个方面，将所述泛菌B-3或所述微生物制剂应用于改善烟叶的品质。

根据本公开的另一个方面，将所述泛菌B-3或所述微生物制剂应用在单宁酶的制备当中。

根据本公开的另一个方面，提供一种烟叶处理方法，包括如下步骤：

（1）调整待处理烟叶水分含量至20～30%；

（2）按照烟叶质量比的20～30%，将所述泛菌B-3的代谢酶产物或所述用微生物制剂均匀喷洒于烟叶表面，然后于温度42～48℃、湿度75～85%的条件下发酵处理6～8d；

（3）发酵完成后，75～85℃下灭活处理15～25min，即成。

上述微生物制剂的制备方法，包括如下步骤：

（1）活化菌种：将泛菌B-3菌株接种NA固体培养基上，35～39℃条件下培养24 h～72 h；

（2）制备种子液：刮取步骤（1）中所培养的菌体，接种于液体NA培养基中，28～32℃条件下进行摇床培养；

（3）扩大培养：将步骤（2）中所得种子液转接扩大培养基，培养至OD₆₀₀=1.4～1.6；

（4）制备粗酶剂：将步骤（3）中发酵液离心，取上清，即得。