[发明专利]一种同时检测血液样品中VK1、MK-4和MK-7的方法在审
| 申请号： | 202211159180.9 | 申请日： | 2022-09-22 |
| 公开（公告）号： | CN115639299A | 公开（公告）日： | 2023-01-24 |
| 发明（设计）人： | 罗稳;孔子青;张雪;喻艾萍;刘华芬 | 申请（专利权）人： | 杭州凯莱谱精准医疗检测技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/06 | 分类号： | G01N30/06;G01N30/88 |
| 代理公司： | 杭州天昊专利代理事务所(特殊普通合伙) 33283 | 代理人： | 向庆宁;曹小燕 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市西湖区三墩*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 同时 检测 血液 样品 vk1 mk 方法 | ||
1.一种同时检测血液样品中VK1、MK-4和MK-7的方法，其特征在于，所述血液样品需先经含有有机酸的蛋白沉淀剂处理，再经磷脂去除板处理。
2.如权利要求1所述方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取血液样品与含有机酸的蛋白沉淀剂混匀，所述有机酸为三氯乙酸、乙酸或甲酸中的任意一种或多种；
(2)加入萃取剂萃取，取上层有机相；
(3)上层有机相加入磷脂去除板处理；
(4)液相色谱串联质谱检测。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述有机酸为三氯乙酸。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述蛋白沉淀剂为乙醇：乙腈：异丙醇＝90:5:5，所述三氯乙酸含量为4％。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述磷脂去除板为FastRemover磷脂去除板。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述磷脂去除板的处理过程为：取上层有机相上样至磷脂去除板对应的孔中，静置5min后正压压缩收集流出液，正压压干后加入异辛烷淋洗，收集淋洗液氮气吹干后乙醇复溶。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述萃取剂为异辛烷。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述液相色谱的流动相A为水：甲醇：异丙醇＝8:1:1，流动相B为甲醇：异丙醇＝9:1，流动相A和流动相B中都含有0.1％甲酸。
9.三氯乙酸用于帮助磷脂去除板去除血液样品中的磷脂，提高血液样品中VK1、MK-4和MK-7检测的信噪比的用途。
10.磷脂去除板用于提高血液样品中VK1、MK-4和MK-7检测的信噪比的用途。
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