[发明专利]基于双重PCR的检测PiAdv-I、PiAdv-II的引物组、试剂盒及方法在审
| 申请号： | 202211150970.0 | 申请日： | 2022-09-21 |
| 公开（公告）号： | CN116064949A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 黄淑坚;刘梦凡;梅堃;刘兆洁;柯骏鸿;姜含雨;赵梓桥;魏无缺;陈作鑫;李树稳 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院;广东省华晟生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人： | 刘婉;林玉芳 |
| 地址： | 528200 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 双重 pcr 检测 piadv ii 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种基于双重PCR的检测PiAdv-I、PiAdv-II的引物组，其特征在于，所述引物组包括：
PiAdv-I-F：ATCCGCCAACAATTACATCA；
PiAdv-I-R：TAGACGATCGTGGTGCTGT；
PiAdv-II-F：TCTTTAGCACTAGTTCAATGTGGGAT；
PiAdv-II-R：ATTGTTTGGGTTAAACTGACTAT。
2.权利要求1所述的引物组用于同时检测PiAdv-I、PiAdv-II的用途。
3.权利要求1所述的引物组用于制备同时检测PiAdv-I、PiAdv-II的试剂的用途。
4.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的引物组。
5.权利要求4所述的试剂盒用于同时检测PiAdv-I、PiAdv-II的用途。
6.权利要求4所述的试剂盒用于制备同时检测PiAdv-I、PiAdv-II的试剂的用途。
7.一种基于双重PCR的检测PiAdv-I、PiAdv-II的方法，其包括以下步骤：
(1)以待检测样品作为模板，使用权利要求1所述的引物组进行双重PCR扩增；
(2)扩增产物经凝胶电泳后，观察结果。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述双重PCR扩增的反应体系为：TaKaRaPremix Taq 5.0μL，上游引物0.5μL，下游引物0.5μL，模板1.0μL，ddH2O 3.0μL，总体积10.0μL。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述上游引物和所述下游引物的浓度为0.1μmol/L至10μmol/L。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述双重PCR扩增的反应程序为：94℃，3min；94℃，30s，55℃，30s，72℃，30s，35个循环；72℃，5min；12℃，∞。
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