[发明专利]抗新冠病毒纳米抗体、制备方法及其应用

权利要求书

1.抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：

所述抗新冠病毒纳米抗体的互补决定区由CDR1和CDR3组成；

所述CDR1为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，所述CDR3为SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列；

或，所述CDR1为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，所述CDR3为SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：

还包括高变区HV2和HV4；

所述HV2为SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列；

所述HV4为SEQ ID NO.7或SEQ ID NO.8所示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：

还包括骨架区FR1、FR2和FR3；

所述FR1为SEQ ID NO.9或SEQ ID NO.10所示的氨基酸序列；

所述FR2为SEQ ID NO.11或SEQ ID NO.12所示的氨基酸序列；

所述FR3为SEQ ID NO.13或SEQ ID NO.14所示的氨基酸序列。

4.根据权利要求1所述的抗新冠病毒纳米抗体，其特征在于：

所述抗新冠病毒纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO.15或SEQ ID NO.16所示。

5.核酸分子，其特征在于：

所述核酸分子包括编码权利要求1-4任一项所述抗新冠病毒纳米抗体的核酸序列；

所述核酸分子包括SEQ ID NO.17或SEQ ID NO.18所示的核酸序列。

6.重组载体，其特征在于：

所述重组载体包括权利要求5-6任一项所述的核酸分子。

7.重组细胞，其特征在于：

所述重组细胞包括权利要求5的核酸分子或权利要求6所述的重组载体。

8.权利要求1-4任一项所述的抗新冠病毒纳米抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)使用SARS-CoV-2S1蛋白免疫条纹斑竹鲨，分离免疫后条纹斑竹鲨的外周血单核细胞并提取总RNA，以所述RNA为模板逆转录制备cDNA；

(2)以所述cDNA为模板，PCR扩增纳米抗体可变区，构建噬菌体展示文库；

(3)在所述噬菌体展示文库中筛选具有SARS-CoV-2抗原特异性的噬菌体抗体，并进行测序，获得抗体的核酸序列；

(4)利用所述抗体的核酸序列构建表达载体，并转入细胞进行表达及纯化，得到所述抗新冠病毒纳米抗体。

9.药物组合物，其特征在于：

所述药物组合物包括权利要求1-4任一项所述的抗新冠病毒纳米抗体、权利要求5所述的核酸分子、权利要求6所述的重组载体、权利要求7所述的重组细胞中的任意一种或至少两种的组合；

所述药物组合物还包括药学上可接受的载体。

10.如权利要求1-4任一项所述的抗新冠病毒纳米抗体、权利要求5所述的核酸分子、权利要求6所述的重组载体、权利要求7所述的重组细胞、权利要求9所述的药物组合物在制备抗SARS-CoV-2药物中的应用。