[发明专利]一种用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库及其构建方法和应用

权利要求书

1.一种用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库，其包括利用序列表中SEQ ID NO:1-200所示的100对引物中的至少90对引物分别对52个油橄榄品种的DNA进行PCR扩增所获得的针对每一个油橄榄品种的至少90个位点的核苷酸序列数据；

其中所述52个油橄榄品种为：‘米提尼(Adramittini)’、‘阿托斯(Agiou Orous)’、‘阿戈尔(Amyglalolia)’、‘豆果(Arbequina)’、‘阿尔波萨娜(Arbosana)’、‘阿斯(Ascolana)’、‘巴尼亚(Barnea)’、‘贝拉(Berat)’、‘边克利拉(Biancolila)’、‘栾桂塔(Blanquette deGuelma)’、‘巴利奥(Borriol de Castellón)’、‘城固32号(Chenggu32)’‘城固53号(Chenggu53)’、‘德里达(Dritto)’、‘爱桑(Elbasan)’、‘安皮特(Empeltre)’、‘鄂植8号(Ezhi8)’、‘佛奥(Frantoio)’、‘科新佛奥(Frantoio de Corsini)’、‘果大尔(GordalSevillana)’、戈达尔(Gordal del Somontano)’、‘格洛桑(Gorossanne)’、‘格里昂(Grignan)’、‘贺吉(Hojiblanca)’、‘华欧9(Huaou9)’、‘卡拉蒙(Kalamon)’、‘孔色(Konservolia)’、‘科罗莱卡(Koroneiki)’、‘卡林(Kalinjot)’、‘拉多利亚优选1号(Ladolia Patron SI)’、‘拉多利亚优选2号(Ladolia Patron SII)’、‘莱星(Leccino)’、‘莱钦塞(Lechín de Sevilla)’、‘马拉凯(Manaki)’、‘小苹果(Manzanilla de Sevilla)’、‘拉巴塔小苹果(Manzanilla de labata)’、‘米扎(Mixaj)’、‘莫拉约罗(Moraiolo)’、‘莫里斯卡(Morisca)’、‘尼肖特(Nisiot)’、‘诺切阿纳(Nociara)’、‘奥托卡(Ottobratica)’、‘配多灵(Pendolino)’、‘皮削利(Picholine)’、‘皮瓜尔(Picual)’、‘皮苦多(Picudo)’、‘沙龙奎(Salonenque)’、“瓦拉(Valanolia)”、“胡耶特(Verdaledel Hérault)”、‘玉蝉44(Yuchan44)’、‘云台14(Yuntai14)’和‘云杂(Yunza)’。

2.根据权利要求1所述的所述的用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库，其包括利用序列表中SEQ ID NO:1-200所示的100对引物中的至少95对引物分别对52个油橄榄品种的DNA进行PCR扩增所获得的针对每一个油橄榄品种的至少95个位点的核苷酸序列数据。

3.根据权利要求1或2所述的所述的用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库，其包括利用序列表中SEQ ID NO:1-200所示的100对引物分别对52个油橄榄品种的DNA进行PCR扩增所获得的针对每一个油橄榄品种的100个位点的核苷酸序列数据。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库的构建方法，其包括以下步骤：

1)利用序列表中SEQ ID NO:1-200所示的100对引物中的至少90对引物分别对52个油橄榄品种的DNA进行PCR扩增，得到若干PCR产物；

2)对步骤1)得到的若干PCR产物进行测序，得到针对每一个油橄榄品种的至少90个位点的核苷酸序列数据；

3)将步骤2)得到的针对每一个油橄榄品种的核苷酸序列数据合并到一个fasta格式文件中，得到分别对应52个油橄榄品种的fasta格式文件，将这些fasta格式文件作为用于油橄榄品种鉴定的种质资源数据库。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其中在步骤1)中，所述PCR扩增的反应程序为：95℃4分钟预变性；98℃变性10秒，60℃退火15秒，72℃延伸45秒，以后每个循环温度降低0.5℃，共20个循环至退火温度降落到50℃；接着95℃4分钟预变性；98℃变性10秒,50℃退火15秒，72℃延伸45秒，循环12次，最后72℃延伸6分钟。