[发明专利]一种云南微球菌及其在畜禽粪便处理中钝化重金属的应用

权利要求书

1.一种云南微球菌TW001，分类命名为Micrococcus yunnanensis TW001，分离于烟台农田土壤，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2022年6月1日，保藏编号为：CCTCCNO:M 2022768，所述云南微球菌TW001的16S rRNA基因序列，长度为1395bp，具体如SEQNO.1所示。

2.权利要求1所述云南微球菌TW001在畜禽粪便处理中钝化重金属的应用。

3.一种包含权利要求1所述云南微球菌TW001的微生物制剂。

4.权利要求3所述微生物制剂在土壤中钝化重金属的应用。

5.根据权利要求4所述微生物制剂的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)菌株活化：无菌开启云南微球菌TW001，挑取菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱30℃培养36小时，待斜面长满菌落用于转接液体种子；

(2)液体种子制备：挑取活化菌株接种于装有种子培养基的容器中，八层纱布封口，于30℃，160-200r/min摇床振荡培养36小时，长出大量菌体细胞，得液体种子；

(3)液体发酵：按体积比1-10％接种量向发酵培养基接入步骤(2)制备的液体种子，转速300-700r/min，溶氧控制20％-50％，pH 7.0-7.2，温度30℃，通气培养48小时，得到菌株TW001的发酵液。

6.根据权利要求5所述微生物制剂的制备方法，其特征在于：所述固体斜面培养基：胰蛋白胨大豆肉汤30g/L，酵母提取物3g/L，琼脂15g/L，蒸馏水溶解定容，将pH值调节至7.0-7.2，以121℃高压蒸汽灭菌20min。

7.根据权利要求5所述微生物制剂的制备方法，其特征在于：所述种子培养基：胰酪胨17g/L，大豆蛋白胨3g/L，葡萄糖2.5g/L，酵母浸粉0.3g/L，氯化钠5g/L，K₂HPO₄2.5g/L，蒸馏水溶解定容，pH7.0-7.2，以121℃高压蒸汽灭菌20min。

8.根据权利要求5所述微生物制剂的制备方法，其特征在于：所述发酵培养基：胰蛋白胨10-20g/L，大豆蛋白胨5-10g/L，葡萄糖1-3g/L，酵母浸粉1-5g/L，MgSO₄ 0.1-0.5g/L，KH₂PO₄ 0.1-1g/L，NaCl2-5g/L，蒸馏水溶解定容，pH7.0-7.2，以121℃高压蒸汽灭菌20min。