[发明专利]结直肠癌甲基化基因标志物及其应用在审
| 申请号： | 202211108637.3 | 申请日： | 2022-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN115627293A | 公开（公告）日： | 2023-01-20 |
| 发明（设计）人： | 陆军;张林锋;闵敬丽;樊鸿宇;罗剑 | 申请（专利权）人： | 上海医创云康生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11;C12N15/12 |
| 代理公司： | 北京秉文同创知识产权代理事务所(普通合伙) 11859 | 代理人： | 陈少丽;孙富利 |
| 地址： | 201400 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 直肠癌 甲基化 基因 标志 及其 应用 | ||
1.一种结直肠癌甲基化基因标志物，其特征在于，所述基因标志物为FFAR2基因和/或Septin9基因。
2.一种FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，包括针对FFAR2基因和Septin9基因的引物和探针；所述针对FFAR2基因的引物和探针的序列如序列表SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示；所述针对Septin9基因的引物和探针的序列如序列表SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示。
3.根据权利要求2所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括针对内参基因GAPDH的引物和探针；所述针对FFAR2基因的引物和探针的序列如序列表SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8和SEQ ID NO：9所示。
4.根据权利要求2所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括核酸提取试剂，所述核酸提取试剂包括核酸裂解吸附液、蛋白酶K溶液、磁珠、洗涤液、洗脱液。
5.根据权利要求4所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述核酸裂解吸附液由如下组分构成：2M盐酸胍、15％TritonX-100、30mM Tris-HCl、2％SDS、3M异硫氰酸胍、15％无水乙醇、15％异丙醇、35％甘油、纯化水。
6.根据权利要求4所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述蛋白酶K溶液由如下组分构成：30mg/ml蛋白酶K、50mM Tris-HCl、40mM氯化钾、50mM氯化钠、20mM氯化钙、15％TritonX-100、40％甘油、纯化水。
7.根据权利要求4所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括亚硫酸盐转化试剂；所述亚硫酸盐转化试剂包括转化液、结合液、脱磺液、磁珠、洗涤液、洗脱液。
8.根据权利要求7所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述转化液由如下组分构成：50％亚硫酸氢铵、15％亚硫酸铵、20％亚硫酸氢钠、4M氢氧化钠、纯化水。
9.根据权利要求7所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述结合液由如下组分构成：15％TritonX-100、30mM Tris-HCl、5M异硫氰酸胍、3M氯化钠、15％无水乙醇、15％异丙醇、40％甘油、纯化水。
10.根据权利要求7所述FFAR2基因和/或Septin9基因甲基化的检测试剂盒，其特征在于，所述脱磺液由如下组分构成：1M氢氧化钠、50mMTris-HCl、35％无水乙醇、20％异丙醇、50mM氯化钠、纯化水。
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