[发明专利]Circ-0000818在制备检测肝纤维化的试剂盒及治疗肝纤维化药物中的用途

说明书

本发明提供了Circ‑0000818在制备诊断肝纤维化的生物标记物中的用途。本发明还提供了检测Circ‑0000818的试剂在制备诊断肝纤维化的试剂盒中的用途。本发明还提供了circ‑0000818在制备治疗肝纤维化药物的用途。通过研究发现circ‑0000818在肝纤维化患者肝组织中表达明显下降，且增加肝星状细胞中circ‑0000818表达能够减轻肝纤维化的病情进展，circ_0000818腺病毒治疗由CCLsubgt;4/subgt;诱导的肝纤维化小鼠，报告基因发现circ‑0000818可抑制miR‑484表达，进而调控星状细胞的自噬相关基因和肝纤维化相关基因表达。

技术领域

本发明属于生物医学领域，涉及一种检测肝纤维化的试剂盒和治疗肝纤维化的药物，具体来说是Circ-0000818在制备检测肝纤维化的试剂盒及治疗肝纤维化药物中的用途。

背景技术

肝纤维化是指肝脏细胞外基质(即胶原、糖蛋白和蛋白多糖等)的弥漫性过度沉积与异常分布，是肝脏对慢性损伤的病理性修复反应，是各种慢性肝病向肝硬化发展过程中的关键步骤和影响慢性肝病预后的重要环节。肝纤维化进一步发展可引起肝小叶结构紊乱，肝细胞结节性再生，形成假小叶结构即肝硬化，临床上出现肝功能减退和门静脉高压症表现。

目前，临床上尚无特异、有效的抗肝纤维化治疗方法，主要通过治疗引起肝损伤的基础疾病来缓解肝损伤和炎症，并对肝纤维化进行防治。而抗肝纤维化药物开发仍面临很大挑战，主要是由于肝纤维化的形成过程和机制复杂，影响因素众多，且个体之间存在较大差异。因此，迄今尚无有效的化学药物和生物制剂用于临床治疗。

临床试验存在的主要问题有：慢性肝病肝纤维化一般病程较长，临床试验不易将生存获益或临床失代偿事件发生减少作为临床终点；发现新的药物需要长期(8.5～14.0年)和大量经济投入；现在的抗肝纤维化药物试验仍需要肝活检判断疗效，亟需理想的生物标志物和影像学检测技术以缩短试验间期和无创性评估等。

血浆、血清中游离RNA，包括miRNA、snoRNA、lncRNA和circularRNAs(circRNAs)的发现是科学发展史上的一个重大突破。目前对circRNAs在循环血中的来源及其能稳定存在机制还未完全阐明。既往研究推测循环RNA的来源包括被动过程和主动过程，被动过程即疾病细胞坏死后游离RNA进入循环血中；主动过程指circRNA通过以凋亡小体或者微粒体形式从细胞中释放。另有研究指出circRNA的结构主要由一个环状环和多个microRNA结合位点组成。封闭结构使circRNA能够抵抗RNA降解途径。由于循环生物标志物收集方便和相对非侵入性，使它能够成为疾病的筛选工具。因此，识别与肝纤维化过程直接相关的circRNA，并且可以用作肝纤维化的诊断标记物，有很深远的临床意义。

此外，circRNA作为miRNA海绵调节基因表达。许多circRNA已被证明存在于细胞核中，circRNA-miRNA轴参与各种级联信号通路，包括凋亡、侵袭、血管化和转移相关的级联信号。重要的是，一些证据表明，circRNA可以在转录或转录后水平调节致病性相关基因的表达。非编码RNA如microRNA和长非编码RNA已被报道为肝星状细胞激活的重要调节因子，并参与肝纤维化/肝硬化的过程。与microRNA和长非编码RNA一样，circRNA也被报道与肝星状细胞激活有关。