[发明专利]一种酱油中酱油酮的定量分析方法

说明书

本发明公开了一种酱油中酱油酮的定量分析方法，属于化学检测技术领域。本发明方法包括：将酱油样品采用二氯甲烷萃取后，氮吹浓缩，得浓缩液A；所述酱油样品与二氯甲烷的体积比为1：(0.25～0.3)；浓缩液A采用展开剂进行薄层层析处理后进行复溶处理，得层析处理品B；所述展开剂为乙酸乙酯和丙酮的混合液，两者的体积比为(7.5:2.5)～(8.5:1.5)；配制酱油酮的标准溶液，将层析处理品B和标准溶液进行UHPLC‑DAD检测，对酱油样品中的酱油酮进行定量分析。该测试方法可针对酱油酮单一物质进行准确定量，同时前处理及检测过程操作简单，无需额外施加环境或使用设备，前处理及分析时间短，经济性价比高。

技术领域

本发明涉及化学检测技术领域，具体涉及一种酱油中酱油酮的定量分析方法。

背景技术

酱油酮(环高呋喃酮)具有典型的焦糖香气，被认为是酱油中的关键香气活性物质，因此对酱油中酱油酮的快速准确定量可以辅助进行酱油品质的判定和监控。一般情况下，酱油酮在酱油中的含量约为0.1～50mg/L，而目前主要用于检测酱油中酱油酮等香气成分的手段包括LLE(液液萃取)、SDE(同时蒸馏萃取)、SPME(顶空固相微萃取)和SAFE(溶剂辅助蒸馏)等前处理方法结合GCMS(气质联用)的检测技术。然而由于酱油酮含量少，极性大，SDE和SPME结合GCMS技术很难检测出酱油酮成分，而LEE结合GCMS虽然可以对酱油酮进行定性，但响应信号差，分析耗时长；SAFE前处理手段虽然可以有效提纯酱油酮，但处理过程繁琐，耗时长且需要特定的SAFE设备，难以做到高性价比高效检测。另一方面，GCMS检测技术主要适合用于多组分的定性定量分析，耗时很长，同样难以针对酱油酮这一单独物质进行快速定量，而酱油中除了酱油酮外，还包含了各种无机和有机基质，干扰物种类多，同时酱油酮本身的极性强，热稳定性差，因此若不进行高效提纯，很难提升酱油酮在定量时的信号强度。

综上所述，现有技术对于酒品中酱油酮的定量分析难以同时做到设备要求低、操作简练高效、测定干扰小及准确性高的特点。

发明内容

基于现有技术存在的缺陷，本发明的目的在于提供了一种酱油中酱油酮的定量分析方法，该方法通过LEE法结合氮吹处理对酱油中的有机活性物质进行富集浓缩，随后对浓缩液采用薄层层析法进行二次提纯以去除大部分杂质干扰，最终采用UHPLC-DAD进行酱油酮的定量分析，该测试方法可以针对酱油酮这一物质进行准确定量，同时前处理及检测过程操作简单，无需额外施加环境或使用设备，前处理及分析时间短，经济性价比高。

为了达到上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种酱油中酱油酮的定量分析方法，包括以下步骤：

(1)将酱油样品采用二氯甲烷萃取后，氮吹浓缩，得浓缩液A；所述酱油样品与二氯甲烷的体积比为1：(0.25～0.3)；

(2)浓缩液A采用展开剂进行薄层层析处理后进行复溶处理，得层析处理品B；所述展开剂为乙酸乙酯和丙酮的混合液，两者的体积比为(7.5:2.5)～(8.5:1.5)；

(3)配制酱油酮的标准溶液，将层析处理品B和标准溶液进行UHPLC-DAD检测，对酱油样品中的酱油酮进行定量分析。

优选地，所述酱油样品包括特级酱油样品、一级酱油样品、二级酱油样品和三级酱油样品。

本发明所述酱油中酱油酮的定量分析方法中，首先通过二氯甲烷以LEE法进行酱油的有机相富集萃取，随后采用氮吹法进行浓缩，所得浓缩液再通过薄层层析处理，以特定合适的展开剂对浓缩液中的酱油酮进行有效分离，排出有机相其他物质的检测干扰，而该步骤并不需要引入额外的特殊环境或设备，相对SAFE法等现有技术耗时缩短，而经后续UHPLC-DAD检测可直接进行酱油酮的定量分析，所述分析出峰耗时仅需约10min，同时酱油酮的响应信号强，准确率高；所述定量分析方法适用性强，针对现有国标分类《酿造酱油》的各特级、一级、二级和三级酱油的酱油酮定量分析均具有效性。