[发明专利]利用甲酸合成聚3-羟基丁酸酯重组希瓦氏菌株及其构建方法与应用在审
申请号: | 202211074719.0 | 申请日: | 2022-09-02 |
公开(公告)号: | CN116179453A | 公开(公告)日: | 2023-05-30 |
发明(设计)人: | 宋浩;田瑶;窦广进;郭之旗;王叶 | 申请(专利权)人: | 天津大学(青岛)海洋工程研究院有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/52;C12N15/54;C12N15/53;C12N15/74;C12P7/625;C12R1/01 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 琪琛 |
地址: | 266237 山东省青岛市蓝色硅*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 甲酸 合成 羟基 丁酸 重组 希瓦氏 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
1.合成聚3-羟基丁酸酯希瓦氏菌株Shewanella halifaxensis构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将含有Saccharomyces cerevisiae S288C来源的基因formate-tetrahydrofolateligase(FTL)通过FTL-pHG12-pBAD质粒引入Shewanella halifaxensis得到可利用甲酸的重组菌株Sh01;
(2)向重组菌株Sh01中通过质粒phaABC-FtL-pHG12-pBAD引入含有Ralstoniaeutropha H16来源的聚3-羟基丁酸酯合成基因phaA、phaB1、phaC1,构建能利用甲酸合成聚3-羟基丁酸酯Shewanella halifaxensis重组菌株Sh02;
所述FTL基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;
phaA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;
phaB1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;
phaC1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1的方法构建得到的合成聚3-羟基丁酸酯Shewanella halifaxensis重组菌株Sh02。
3.权利要求2的重组菌株在生产聚3-羟基丁酸酯的用途。
4.根据权利要求3所述用途,其特征在于,包括如下步骤:将权利要求2的合成聚3-羟基丁酸酯希瓦氏菌株Sh02在发酵培养基中培养发酵,获得聚3-羟基丁酸酯,所述发酵培养基配方为40g/L海盐,20g/L甲酸钠,其余为水。
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