[发明专利]一种α-(1,4)(1,6)-葡聚糖及其制备方法与应用

说明书

本发明属于天然多糖技术领域，公开了一种α‑(1,4)(1,6)‑葡聚糖及其制备方法与应用。所述α‑(1,4)(1,6)‑葡聚糖主要由葡萄糖组成，相对分子量为2300‑3300kDa，其二糖连接有Glc‑(1→4)‑Glc和Glc‑(1→6)‑Glc。抗氧化活性筛选结果表明，所述α‑(1,4)(1,6)‑葡聚糖在20mg/mL浓度下，DPPH自由基清除率可达到86.24％；在5mg/mL浓度下，羟自由基清除率可达到37.16％，具有较好的抗氧化能力。

技术领域

本发明属于天然多糖技术领域，尤其涉及一种α-(1,4)(1,6)-葡聚糖及其制备方法与应用。

背景技术

植物多糖具有重要的生物学活性，尤其是中药多糖，因其毒副作用小、生物兼容性好，已被广泛用于天然药物和保健食品的开发。目前，以糖类为基础的药物研究日益受到重视并逐渐成为国内外医药界的前沿课题，已有超过50种多糖药物正在进行临床试验，中药来源的多糖物质具有潜在广泛的应用前景。

天麻是兰科植物天麻Gastrodia elata Blume的干燥块茎，性平，味甘，归肝经。天麻作为一种重要的传统中药，始载于《神农本草经》并被列为上品。《中国药典》记载其功效为息风止痉、平抑肝阳、祛风通络，主治小儿惊风、癫痫抽搐、破伤风、头痛眩晕、手足不遂、肢体麻木、风湿痹痛等。它自古以来就被广泛应用于临床治疗，其现代药理作用可归结为“三抗、三镇、一补”，即抗癫痫、抗惊厥、抗风湿，镇静、镇痉、镇痛，补虚，在2021年天麻被正式纳入了国家药食同源名录。

天麻多糖(GEP)是天麻药效的重要组成部分，药理研究表明这类大分子物质具有抗氧化、抗衰老、免疫调节、神经保护、抑制神经炎症、抑制动脉粥样硬化、抗高血压、改善血脂、抗病毒、抗肿瘤、抗癌、调节肠道菌等多种生物活性。根据文献报道，目前已从天麻中分离纯化到约13种多糖和2种大分子线性葡聚糖，其中仅有7种推测出基本骨架为α-1,4-葡聚糖和α-1,4,6-葡聚糖，少量含有3位取代分支结构。

本发明希望针对天麻多糖(GEP)展开进一步开发和研究，以期得到新的天麻多糖种类，从而更好利用天麻这一中药资源。

发明内容

本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种α-(1,4)(1,6)-葡聚糖及其制备方法与应用。抗氧化活性筛选结果表明，所述α-(1,4)(1,6)-葡聚糖在20mg/mL浓度下，DPPH自由基清除率(DRSR)可达到86.24％；在5mg/mL浓度下，羟自由基清除率(HRSR)可达到37.16％，具有较好的抗氧化能力。

本发明提供一种α-(1,4)(1,6)-葡聚糖(命名为GEP2-6)，其相对分子量为2300-3300kDa，结构式如下所示：

其中，x、y和n为正整数，且x+y＝47。

将GEP2-6进行TFA酸水解-PMP衍生化，再运用液相色谱-质谱法(LC-MS)分析，通过与单糖和寡糖标准品的比对发现，GEP2-6主要由葡萄糖(Glc)组成，其二糖连接有Glc-(1→4)-Glc和Glc-(1→6)-Glc；再经完全甲基化、水解、还原、乙酰化等反应，运用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析其糖苷键连接类型与比例，结果表明GEP2-6含有1,4和1,6连接的葡萄糖残基。结合红外(FT-IR)和核磁(NMR)解析结果显示，明确了所述多糖组分GEP2-6为α-(1,4)(1,6)-葡聚糖。

优选地，所述α-(1,4)(1,6)-葡聚糖的相对分子量为2500-2900kDa。

本发明还提供了上述α-(1,4)(1,6)-葡聚糖的制备方法，包括以下步骤：

(1)将干燥的天麻药材粉碎、过筛，制成天麻粗粉；

(2)将所述天麻粗粉经脱脂、水提、醇沉、洗涤，即得天麻粗多糖；