[发明专利]盾壳霉YAFEF037菌株及其分离方法和应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，尤其公开一种盾壳霉YAFEF037菌株及其分离方法和应用，保藏名称为盾壳霉YAFEF037(Coniothyrium sp.YAFEF037)；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2022610，本发明对多种致病细菌有较好的抑制作用，能有效的缓解耐药菌株带来的危机，为探究新的抗细菌药物提供新的途径，并对开发新型生物农药提供重要指导依据。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种盾壳霉YAFEF037菌株及其分离方法和应用。

背景技术

共生真菌(Plant symbiotic fungi)是植物生活史的特定阶段或全部阶段寄生在植物组织内，而不引起植物产生有害症状的微生物，包括菌根真菌以及生活在植物表面的内生真菌和潜伏性病原菌。研究表明，在长期共进化过程中，共生菌与宿主植物形成了特殊的生理代谢途径，产生出各种结构新颖的活性化合物，目前还有很多活性共生菌未被开发，对我们开发新的抗菌药物有重要的作用，能有效缓解耐药菌株带来的危机。

目前共生菌的初级代谢和次生代谢产物已成为研究热点，已经有学者在苦楝、香椿、黄芪和党参等多种植物共生菌中发现具有抗细菌、抗氧化、抗真菌等的天然活性物质。植物的各个部位如叶、花、树皮和根等均含有丰富的次生代谢产物，部分次生代谢产物具有优良的抗菌活性，尤其对一些耐药性细菌具有较强的拮抗活性，如生物碱类、萜类、黄酮类和醌类等。为了杀死植物病菌或者抑制病菌活性，人们发明了抗生素和合成抗菌药物，随着抗菌药物的广泛应用，致病细菌对抗生素产生耐药性，甚至出现了多重耐药性，致病菌耐药性的发生和蔓延已构成对人类健康的严重威胁，研究新的抗菌药物已经成为一个重大的科研命题。

哈巴乌头(Aconitum habaense)系毛茛科(Ranunculaceae)乌头属(Aconitum L.)草本植物，产于云南省西北部，生于海拔4000米左右的山地林边灌丛或草丛，是藏区常用的药用植物。乌头属植物具有显著的生理活性，如：镇痛、局麻、镇静、解热和强心等功效，含有二萜生物碱、4-甲氧基苯甲酸、，3,4-二甲氧基苯甲酸和β-谷甾醇等化合物。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种盾壳霉YAFEF037菌株及其分离方法和应用，本发明通过分离筛选哈巴乌头的共生菌，得到一株具有抗菌活性的真菌 YAFEF037，通过实验发现，YAFEF037菌丝体提取物对蜡样芽孢杆菌、无乳链球菌、藤黄微球菌、大肠埃希菌等细菌具有较好的耐药性，为研究开发新的抗细菌药物提供新的途径。

为了实现上述目的，本发明通过如下技术方案实现：

本发明的盾壳霉YAFEF037菌株，该菌株为哈巴乌头根部共生真菌；保藏名称为盾壳霉YAFEF037(Coniothyrium sp.YAFEF037)；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址是中国武汉大学；保藏日期：2022年5月12日；保藏编号:CCTCC M 2022610。所述的盾壳霉YAFEF037菌株的ITS基因序列包括SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

本发明还提供了一种菌剂，包括盾壳霉YAFEF037菌株的培养物或其加工物。

进一步的，一种菌剂，其活性成分包括如下(a)(b)(c)中的至少一种：

(a)盾壳霉YAFEF037菌株的菌丝体粗提物；

(b)盾壳霉YAFEF037菌株细胞的超声裂解上清；

(c)盾壳霉YAFEF037菌株细胞的超声裂解沉淀。

优选的，培养盾壳霉YAFEF037菌株的培养基为OSMM培养基。

优选的，所述OSMM培养基包括如下组分：大米10g/瓶，MM液体培养基 15mL/瓶，所述MM液体培养基包括：硝酸钠6g/L，氯化钾0.52g/L，七水硫酸镁0.52g/L，磷酸二氢钾1.52g/L。