[发明专利]一种用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法

权利要求书

1.一种用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)场内操作：在猪场生产区内用温水将猪耳部血管较少的边缘擦洗干净，用生理盐水冲洗擦洗过的猪耳边缘多次，再用酒精棉球擦拭多次，剪下小块猪耳组织放入含双抗的生理盐水中送出场区；

(2)场外操作：将经过步骤(1)处理过的小块猪耳组织放入酒精中，旋涡震荡，用生理盐水冲去酒精，将猪耳组织放入含双抗的DMEM培养液中，低温送回实验室；

(3)实验室预操作：将经过步骤(2)处理过的猪耳组织放入酒精中，旋涡震荡，用超纯水冲去酒精，用HBSS培养液清洗数次后，刮去表面毛发和表皮，剪小后即可进行组织块培养。

2.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(1)中，用温水进行清洗至表面干净，温水用量为1-2L，用生理盐水冲洗3-4次，每次生理盐水用量为8-10mL，用酒精棉球擦拭3-4次，每次更换新的酒精棉球。

3.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(1)中，剪下小块猪耳组织为1.0-1.5cm²，含双抗的生理盐水中的双抗为青霉素和链霉素，含双抗的生理盐水中青霉素和链霉素的浓度均为500IU/mL，含双抗的生理盐水的用量为每1.0cm²的猪耳组织样品1.0-2.0mL。

4.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(2)中，含双抗的DMEM培养液中的双抗为青霉素和链霉素，含双抗的DMEM培养液中青霉素和链霉素的浓度均为500IU/mL。

5.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(2)中，酒精的用量为每1.0cm²的猪耳组织样品2.0-3.0mL，含双抗的DMEM培养液的用量为每1.0cm²的猪耳组织样品1.0-2.0mL。

6.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(2)中，旋涡震荡的时间不超过2min。

7.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(2)中，低温送回实验室的时间不超过12h。

8.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(3)中，酒精的用量为每1.0cm²的猪耳组织样品2-3mL，旋涡震荡的时间为1-2min。

9.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中，生理盐水的浓度为0.9％。

10.根据权利要求1所述的用于猪耳组织成纤维细胞培养的样品采集方法，其特征在于，步骤(2)和步骤(3)中，酒精的浓度为75％。