[发明专利]检测不同呼吸道病原体的组合物、方法及其用途

说明书

本发明属于分子生物学检测领域，具体地，涉及检测不同呼吸道病原体的组合物，更具体地，涉及检测副流感病毒2型(HPIV2)、副流感病毒4型(HPIV4)以及腮腺炎病毒的组合物。与此同时，还提供了包含所述组合物的试剂盒，所述组合物的用途，以及用于检测不同呼吸道病毒的方法。本发明提供组合物在单管反应体系中同时实现HPIV2、HPIV4，和腮腺炎病毒的检测。使得不同毒株能够得到区别对待，从而使得治疗和预防更效率。同时，本发明的组合物，其检测的灵敏度更高，达到100拷贝/mL，检测更为准确，针对易漏检的HPIV4设计两套引物和探针防止漏检。

技术领域

本发明属于分子生物学检测领域，具体地，涉及检测不同呼吸道病原体的组合物，更具体地，涉及检测副流感病毒2型(HPIV2)、副流感病毒4型(HPIV4)以及腮腺炎病毒的组合物。

背景技术

人副流感病毒(human parainfluenza virus，HPIV)属副粘病毒科，为负性单链RNA病毒，是常见的社区获得性呼吸道感染病原，因其诸多特性与流感病毒不同，且又陆续分离得到其他病毒株，故被命名为副流感病毒。HPIV可分为两大类：呼吸道病毒属(HPIV1和HPIV3)及腮腺炎病毒属(HPIV2和HPIV4)。各型病毒主要结构和生物学特征相似，但流行病学和所引发疾病的临床特征有差异。HPIV广泛存在于自然界，所致疾病的发病率仅次于呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus，RSV)，血清学调查显示绝大多数6～10岁儿童曾感染过HPIV，目前它已成为可导致最沉重疾病负担及影响经济的病毒之一。

HPIV2在非免疫抑制或无合并慢性病的儿童，喉气管支气管炎是最常见的疾病。HPIV4由于感染症状轻微，因此并未引起人们足够的重视，但近年有血清学流调资料显示，在所有呼吸道感染患者中HPIV4抗体阳性约占3％，而儿童和青少年却高达50-90％。腮腺炎病毒(mumps virus)属副粘病毒科，为负性单链RNA病毒。人是腮腺炎病毒惟一宿主，病毒经飞沫传播，易感者为学龄期儿童，好发于冬春季节。本病潜伏期约2～3周，病毒侵入呼吸道上皮细胞和局部淋巴结内增殖后，能引起腮腺、舌下腺、颚下腺肿大、头痛、发烧，并能引起多种并发症。

因此，HPIV2、HPIV4，和腮腺炎病毒成为儿童较易感染的病毒，且由于感染之后症状相似，本领域需求一种能够检测这些病毒病的组合物，使得不同病毒能够得到区别对待，从而使得治疗和预防更效率，并且灵敏度高，特异性好，操作简单，成本低。

发明内容

有鉴于此，第一方面，本发明提供一种检测不同呼吸道病原体的组合物，其特征在于，所述组合物包括：

如SEQ ID NO:1～3所示的检测HPIV2的上下游引物及探针；

如SEQ ID NO:4～6所示的检测HPIV4的上下游引物及探针；以及

如SEQ ID NO:10～12所示的检测腮腺炎病毒的上下游引物及探针。

进一步地，所述组合物包括：如SEQ ID NO:7～9所示的检测HPIV4的上下游引物及探针。

本发明提供的检测呼吸道病原体的组合物，主要利用多重荧光PCR分析方法，通过检测呼吸道病原体上的不同的位点，对不同呼吸道病原体进行检测，从而在单管反应体系中同时实现HPIV2、HPIV4，和腮腺炎病毒的检测。使得不同毒株能够得到区别对待，从而使得治疗和预防更效率。同时，本发明的组合物，其检测的灵敏度更高，达到100拷贝/mL，检测更为准确，针对易漏检的HPIV4设计两套引物和探针防止漏检。

进一步地，所述组合物包括：检测内标的上下游引物及探针。

在一些具体的实施方案中，内标是人源内标基因。在一个具体的实施方案中，内标是人管家基因。