[发明专利]一种好氧反硝化组合菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种门多萨假单胞菌IHB602，其特征在于：所述的门多萨假单胞菌IHB602于2022年4月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，其地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学，保藏编号为CCTCC No.M2022494。

2.一种甲基杆菌DC-1，其特征在于：所述的甲基杆菌DC-1于2022年3月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学，保藏编号为CCTCC No.M2022232。

3.一种施氏假单胞菌IHB618，其特征在于：所述的施氏假单胞菌IHB618于2022年4月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏单位地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学，保藏编号为CCTCC No.M2022493。

4.权利要求1所述的门多萨假单胞菌IHB602、权利要求2所述的甲基杆菌DC-1和/或权利要求3所述的施氏假单胞菌IHB618在制备废水处理好氧反硝化组合菌剂中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述的门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的数量比为1:0.5-2:0.5-2，优选为1:1:1。

6.一种好氧反硝化组合菌剂，其特征在于：所述的组合菌剂包括权利要求1所述的门多萨假单胞菌IHB602、权利要求2所述的甲基杆菌DC-1和/或权利要求3所述的施氏假单胞菌IHB618。

7.根据权利要求6所述的组合菌剂，其特征在于：所述的门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的数量比为1:0.5-2:0.5-2，优选为1:1:1。

8.一种好氧反硝化组合菌剂的制备方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：

(1)将菌株置于DTM培养基中生长，定期取样，测定OD₆₀₀值，并根据时间和OD₆₀₀值的关系绘制生长曲线图，在对数后期生长阶段收获菌液，离心，去除上清液，得到浓缩菌株；

(2)将浓缩菌株重悬于共聚集缓冲液中洗涤，得到含有菌株的悬浮液A；

(3)调节悬浮液A的吸光度值至OD₆₀₀＝1，得到悬浮液B；

(4)按照步骤(1)-(3)的方法，分别制得门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的悬浮液；

(5)将等体积的门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的悬浮液混合，并记录OD₆₀₀值；使用聚集指数计算共聚集的百分比，获得最优共聚集组合菌剂；

所述共聚集指数的公式为：

其中，At为静置时间为t小时的OD₆₀₀数值；A0为静置时间为0时的OD₆₀₀数值。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于：所述共聚集缓冲液为CaCl₂、NaCl、Tris和MgCl₂的混合溶液。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述混合溶液中各物质的浓度分别为：1mM CaCl₂，150mM NaCl，10mM Tris，1mM MgCl₂。

11.权利要求1所述的门多萨假单胞菌IHB602、权利要求2所述的甲基杆菌DC-1、权利要求3所述的施氏假单胞菌IHB618和/或权利要求6所述的组合菌剂在废水处理中的应用。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于：所述的应用发生于序批式生物膜反应器中。

13.一种废水处理的方法，其特征在于：所述的方法包括以下步骤：

(1)在生物膜反应器中添加门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1、施氏假单胞菌IHB618和/或好氧反硝化组合菌剂，测量并分析生物膜的厚度和含量；

(2)通入废水，进行废水处理；

(3)在反应器稳定运行时，检测高效共聚集脱氮菌剂的丰度。