[发明专利]解淀粉芽孢杆菌来源的温度诱导型启动子及其应用在审
| 申请号: | 202210945725.2 | 申请日: | 2022-08-08 |
| 公开(公告)号: | CN116064522A | 公开(公告)日: | 2023-05-05 |
| 发明(设计)人: | 罗正山;徐虹;朱逸凡;严一凡;杜姗姗;李莎;王瑞 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
| 主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/07 |
| 代理公司: | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人: | 仇钰莹 |
| 地址: | 210000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淀粉 芽孢 杆菌 来源 温度 诱导 启动子 及其 应用 | ||
1.温度诱导型启动子,其特征在于,具有如SEQ ID NO.1~10任一所示的核苷酸序列。
2.含有权利要求1所述温度诱导型启动子的重组表达载体。
3.含有权利要求2所述重组表达载体的微生物细胞。
4.根据权利要求3所述的微生物细胞,其特征在于,所述微生物细胞为细菌细胞或真菌细胞。
5.根据权利要求4所述的微生物细胞,其特征在于,所述细菌包括但不限于:大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillus
amyloliquefaciens)。
6.一种调控微生物目的蛋白表达量的方法,其特征在于,将编码目的蛋白的基因连接至权利要求1所述的温度诱导型启动子的下游,将含有所述基因的微生物培养基中培养,并在特定温度下诱导所述温度诱导型启动子起始目的基因的转录。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法是:将编码目的蛋白的基因连接至SEQ ID NO.2所示的启动子PgltA下游,将含有所述基因的微生物培养基中培养,并在25~42℃诱导所述温度诱导型启动子起始目的基因的转录。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法是:将编码目的蛋白的基因连接至SEQ ID NO.6所示的启动子PpgsB或SEQ ID NO.7所示的启动子Ppyk下游,将含有所述基因的微生物培养基中培养,并在25~30℃诱导所述温度诱导型启动子起始目的基因的转录。
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法是:将编码目的蛋白的基因连接至SEQ ID NO.4所示的启动子Pcitz或SEQ ID NO.9所示的启动子Ppgk下游,将含有所述基因的微生物培养基中培养,并在37~42℃诱导所述温度诱导型启动子起始目的基因的转录。
10.权利要求1所述的温度诱导型启动子,或权利要求2所述的重组表达载体,或权利要求3~5任一所述的微生物细胞,或权利要求6~9任一所述的方法在调控目的基因表达方面的应用。
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