[发明专利]一种光敏型修复骨缺损水凝胶及其制备方法

权利要求书

1.一种光敏型修复骨缺损水凝胶，其特征在于，包括甲基丙烯酰化明胶水凝胶以及包埋在所述甲基丙烯酰化明胶水凝胶内的骨髓间充质干细胞；

其中，所述骨髓间充质干细胞采用microRNA-191抑制剂转染。

2.根据权利要求1所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶，其特征在于，所述骨髓间充质干细胞在所述甲基丙烯酰化明胶溶液内的浓度为2.5×10⁵个/50μL；

所述甲基丙烯酰化明胶的浓度为15％w/v。

3.根据权利要求1所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶，其特征在于，转染microRNA-191抑制剂的骨髓间充质干细胞具有成骨作用。

4.一种如权利要求1-3中任意一项所述的光敏型修复骨缺损水凝胶的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

S100、制备甲基丙烯酰化明胶；

S200、制备甲基丙烯酰化明胶水凝胶；

S300、制备骨髓间充质干细胞，将所述骨髓间充质干细胞转染microRNA-191抑制剂，以制得目标细胞；

S400、将所述目标细胞包埋在所述甲基丙烯酰化明胶水凝胶中，以制得光敏型修复骨缺损水凝胶。

5.根据权利要求4所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶的制备方法，其特征在于，在S100中，包括如下步骤：

S101、取明胶原料溶于蒸馏水中，用水浴将反应体系升温至50℃，加入甲基丙烯酸酐，反应4h，以制得酸酐化溶液；

S102、将所述酸酐化溶液降温至40℃后，缓慢与冰丙酮混合，离心处理后弃去上层清液，以制得沉淀产物；

其中，所述酸酐化溶液与冰丙酮的体积比为1:4；

S103、将所述沉淀产物依次用蒸馏水进行透析处理、在超低温冰箱中冷冻以及在冷冻干燥机中干燥，以制得甲基丙烯酰化明胶；

其中，所述明胶原料、所述蒸馏水以及所述甲基丙烯酸酐重量份之比为1：10：0.6：

其中，所述明胶原料、所述蒸馏水的重量体积比(w/v)为1:10；所述明胶原料、所述甲基丙烯酸酐重量体积比(w/v)为1:0.6。

6.根据权利要求5所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶的制备方法，其特征在于，所述离心处理至少满足以下条件：温度为4℃，转速为4000rpm，时间为10min；

所述透析处理至少满足以下条件：温度为40℃，时间为72h；

所述冷冻至少满足以下条件：温度为-80℃，时间为12h；

所述干燥至少满足以下条件：温度为-20℃，时间为24h。

7.根据权利要求4所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶的制备方法，其特征在于，在S200中，包括如下步骤：

S201、对所述甲基丙烯酰化明胶的正反两面进行除菌处理；

S202、将磷酸缓冲盐溶液与光引发剂进行第一次溶解，并将溶解液在超净工作台中，进行过滤除菌处理，以制得引发剂溶液；

S203、将除菌后的所述甲基丙烯酰化明胶与所述引发剂溶液进行第二次溶解，以制得甲基丙烯酰化明胶水凝胶溶液；

其中，所述光引发剂、磷酸缓冲盐溶液的重量体积比(w/v)为1:200；

所述甲基丙烯酰化明胶与所述引发剂溶液的重量体积比为15:100；

所述甲基丙烯酰化明胶溶液的浓度为15％w/v。

8.根据权利要求7所述的一种光敏型修复骨缺损水凝胶的制备方法，其特征在于，所述紫外线灭菌处理至少包括以下步骤：所述甲基丙烯酰化明胶的正面与反面均采用紫外线灭菌，且时间均为0.5h；

所述过滤除菌处理的滤器为0.45μm；

所述第一次溶解至少满足以下条件：使用超声波助溶，时间为30min；

所述第二次溶解至少满足以下条件：使用水浴助溶，温度为40℃。