[发明专利]罗哌卡因的应用、检测抗生素类药物浓度的方法、试剂盒及应用

说明书

本申请涉及血药浓度监测的技术领域，更具体涉及罗哌卡因的应用、检测抗生素类药物浓度的方法、试剂盒及应用。本申请提供的检测方法和试剂盒通过了解化合物的性质，选择利用罗哌卡因来作为内标，用来校准样品提取、HPLC进样及色谱分离和检测中产生的偏差，从而实现准确定量，解决了目前头孢霉素类药物、碳青霉烯类、酶抑制剂类、三唑类等化合物内标的缺乏或者同位素内标昂贵的问题，可用于以上化合物的血药浓度监测。

技术领域

本申请涉及血药浓度监测的技术领域，更具体地说，涉及罗哌卡因的应用、检测抗生素类药物浓度的方法、试剂盒及应用。

背景技术

目前，治疗药物监测（TDM）常用的分析方法主要包括免疫学方法、高效液相色谱法（HPLC）、液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）。其中，TDM传统的分析技术主要以免疫学方法为主。免疫学方法具有灵敏度高、分析速度快、自动化程度高、操作简便等优点，适合大批量样品的测定，但是受药物抗体种类的限制，绝大多数TDM药物没有合适的抗体供应，也不能够同时测定多种药物或代谢物。HPLC具有专属性强、线性范围比较广、稳定性相对好，成本低，普及率高等优点，但是HPLC的灵敏度低，样本前处理分析周期长，有时不能兼顾多种物质同时检测。而LC-MS/MS具有灵敏度高，特异性强，分析速度快以及高通量等优点，已经成为生物样本分析定量的金标准。

相关技术中LC-MS/MS在TDM中主要采用同位素内标法和外标法进行定量检测。然而，利用同位素内标法检测人血清中的血药浓度时，需要用到同位素内标化合物，一方面，由于稳定的同位素内标化合物合成代价过高或合成难度太大，难以实现商品化，故绝大多数的血药浓度监测不存在商品化的同位素内标化合物；另一方面，由于检测人血清中的血药浓度时，绝大多数血药浓度会较高，对于存在商品化的同位素内标化合物，血药浓度监测过程中同位素内标化合物的使用量会较大，会给血药浓度监测造成昂贵的成本。外标法定量检测人血清中的血药浓度时，检测前期需要进行样本净化，样本净化需要利用蛋白沉淀法（PPT）去除血清中的蛋白，然后进行多步稀释才可进样检测；然而，多步稀释会引入较大的误差，从而导致对人血清中血药浓度的定量结果不准，给外标法定量检测造成了较大的困难。

发明内容

为了提供一种成本低，且可以用于同时检测多种药物浓度的检测方法，本申请提供罗哌卡因的应用、检测抗生素类药物浓度的方法、试剂盒及应用。

第一方面，本申请提供罗哌卡因在检测抗生素类药物浓度的方法中作为内标化合物的应用。采用如下技术方案：

一种罗哌卡因在检测抗生素类药物浓度的方法中作为内标化合物的应用。

优选地，所述检测抗生素类药物浓度的方法采用LC-MS/MS进行检测。

优选地，所述LC-MS/MS的色谱条件为：

色谱柱：Agela Venusil C18，3.0×50mm，粒径为3μm；

流动相A：含0.1%甲酸的水；

流动相B：含0.1%甲酸的甲醇：乙腈的体积比为1：1；

流速：0.45-0.55mL/min；

进样体积：4-6μL；

柱温：35-45℃。

优选地，梯度洗脱程序如下：

优选地，所述抗生素类药物选自头孢霉素类药物、碳青霉烯类、酶抑制剂类和三唑类化合物。

优选地，所述抗生素类药物包括头孢霉素类药物。

优选地，所述罗哌卡因可用于同时检测头孢霉素类药物与选自碳青霉烯类、酶抑制剂类、三唑类化合物中的任意药物的组合。

优选地，所述罗哌卡因可用于同时检测头孢哌酮与选自亚胺培南、西司他丁、美罗培南、伏立康唑、氟康唑中的任意药物的组合。