[发明专利]用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物的应用

说明书

本发明涉及一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用，所述标志物，包括阴道宫颈微生物，所述阴道宫颈微生物包括Lactobacillus crispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillus iners（惰性乳杆菌）。本发明在研究宫颈微生态对辅助生殖技术妊娠结局的影响时，发现了宫颈菌群的组成对妊娠结局的影响，并发现了宫颈菌群中Lactobacillus crispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillus iners（惰性乳杆菌）对妊娠结局进行准确预测。特别是，本发明形成对辅助生殖技术人群的妊娠成功率的预测，对是否展开新周期辅助生殖技术的应用进行指导，提高了妊娠成功率。

技术领域

本发明属于人类辅助生殖领域。具体地，本发明提供了一种更可靠和准确的标志物，用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的可能性。

背景技术

辅助生殖技术的建立与发展，为不孕症家庭带来了希望。体外受精-胚胎移植（IVF-ET）作为主要的辅助生殖技术手段，为不孕症患者提供了有效的治疗方法。然而，其单次移植的临床妊娠率仅为40%-50%，并且有部分患者存在反复植入失败的情况。如何提高胚胎移植的成功率，一直是辅助生殖技术领域的热点和难点问题。成功的妊娠不仅需要发育良好的胚胎，也需要健康的子宫微环境。目前，即使移植经过染色体筛选的遗传学正常的囊胚，其单次成功妊娠的概率也不足65%。研究人员公认子宫微环境因素已经成为制约辅助生殖技术成功的关键因素。

子宫通过宫颈和阴道与外界相通。随着微生物组研究的不断深入，越来越多的研究发现生殖道的微生物组组成会影响子宫微环境，可能影响辅助生殖技术成功率（Koedooder 等人，2019）。

中国专利申请CN112384633A 描述了一种基于阴道内阴道加德纳菌、乳酸杆菌、詹氏乳酸杆菌和变形菌门的相对丰度来预测辅助生殖技术不会导致怀孕的方法。

此外，中国专利申请CN103930786A描述了一种基于尿液样品中存在的乳酸菌和葡萄球菌的相对量来预测受试对象怀孕成功或失败的方法。

这些预测方法初步探索了泌尿生殖道系统微生物组的组成对于预测辅助生殖技术成功率的可能性。尽管如此，随着微生物组检测技术和医学认知的不断进步与完善，临床实践的不断累积，生殖道微生物对于辅助生殖技术成功率的预测的方法也在不断标准化和精准化，预测的敏感性和特异性也逐渐提高，为选择切实满足临床医疗需求的生物标志物提供了可能。

发明内容

本发明的发明人经过标准化和规范化的样本采集、微生物检测和数据分析，发现了利用特定的宫颈菌群作为预测辅助生殖技术妊娠结局的标志物，可以有效预测体外受精-胚胎移植的生化妊娠率和临床妊娠率。

为深入了解阴道微生物在预防女性泌尿生殖系统疾病和维持健康方面的作用，2011年Jacques Ravel等人为对396名北美女性的阴道微生物进行采样并测序，发现育龄期妇女的阴道微生物群能够分为五组，其中四组分别以惰性乳杆菌、卷曲乳杆菌、格氏乳杆菌或詹氏乳杆菌为主，而第五组的乳酸菌比例较低，严格厌氧菌的比例较高，如Atopobium,Gardnerella 等。【Ravel J,et al. Vaginal microbiome of reproductive-age women.Proc Natl Acad Sci USA.2011】。

卷曲乳杆菌是人类阴道微生物群的常见成分。卷曲乳杆菌可以通过自身产生抗菌剂，同时竞争性排斥病原菌，进而促进宿主的泌尿生殖道健康。

惰性乳杆菌是一种最近在阴道内检测到的物种，目前尚不清楚该物种在阴道健康中的作用。

不局限于任何理论，本发明人首次发现Lactobacillus crispatus（卷曲乳杆菌）和Lactobacillus iners（惰性乳杆菌）在成功妊娠的人群的阴道内的存在具有一定特性。本发明由此提出一种用于预测辅助生殖技术中成功妊娠的标志物及其应用。