[发明专利]一种长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维的制备和其作为黏膜佐剂的应用

权利要求书

1.一种长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

1)将野生型细菌接种到LB培养基中，并在37℃下培养过夜，在0-4℃条件下离心收集细菌，并用磷酸盐缓冲液洗涤后，将细菌重悬分散在磷酸盐缓冲液中；

2)采用涡旋振荡用于分离菌种和鞭毛纤维，并在0-4℃条件下离心收集含有鞭毛蛋白纤维的上清液，之后加入含有聚乙二醇的NaCl水溶液，0-4℃放置过夜，使鞭毛蛋白纤维沉淀出来，并将鞭毛蛋白纤维重新悬浮分散在磷酸盐缓冲液中；

3)将获得的鞭毛蛋白纳米纤维超声处理，最终获得长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维。

2.根据权利要求1所述的一种长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维的制备方法，其特征在于：所述野生型细菌选自野生型沙门氏菌(Salmonella)，创伤弧菌(vibrio vulnificus)，单核细胞增生利斯特氏菌(Listeria monocytogenes)。

3.根据权利要求1所述的一种长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维的制备方法，其特征在于：步骤4)所述的超声为探头超声时，探头振幅为65-75％。

4.根据权利要求1所述的一种长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维的制备方法，其特征在于：步骤4)所述的超声的时长为0-3min。

5.利用权利要求1-4中任意一项所述的方法制备的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维。

6.根据权利要求5所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维，其特征在于，所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维具有可控的黏液穿透能力。

7.权利要求5所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维在免疫调控方面的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维无细胞毒性，并实现了对2种模式识别受体的活化，其中包括对Toll样受体5的活化和对NOD样受体NLRC4、NLRP3的活化。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维可以作为黏膜免疫佐剂，诱导机体产生体液免疫反应。

10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的长度可控的鞭毛蛋白纳米纤维可以诱导机体产生细胞免疫反应，并抑制肿瘤的生长。