[发明专利]一种ARTP诱变黑公子小丑鱼体色变红的方法

说明书

本发明提供一种ARTP诱变黑公子小丑鱼体色变红的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1，采集黑公子小丑鱼受精卵；S2，进行ARTP照射，所述ARTP照射的参数为：射频输入功率为240‑320W，氦气流量为8‑12L/min，照射距离为1.8‑2.2mm，照射时间为3‑10min；S3，将ARTP照射后的受精卵进行孵化后培育成幼鱼，即得体色变红的小丑鱼。本发明方法能将黑公子小丑鱼体色由黑白相间诱变成红白相间，并具有可重复性。

技术领域

本发明涉及一种ARTP诱变黑公子小丑鱼体色变红的方法，属于观赏鱼育种技术领域。

背景技术

黑公子小丑鱼(Amphiprion ocellaris var)属于雀鲷科，双锯鱼属，分布于澳洲珊瑚区、达尔文海域。随着年龄增长体色会转为淡褐、黑褐色，至成鱼时则会呈现黑白相间的模样，且年龄越大色泽越黑。黑公子小丑鱼是公子小丑鱼因地域性而产生的变异种，是一种常见的海洋观赏鱼。但是，黑公子小丑鱼只是呈现黑白相间的模样，颜色不够丰富，降低了观赏性。若对黑公子小丑鱼进行诱变育种，使其体色艳丽，则可以增强其观赏性和商品价值。

ARTP是常温室压等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma)的简称，能够在大气压下产生温度在25-40C之间的、具有高活性粒子(包括处于激发态的氦原子、氧原子、氮原子、OH自由基等)浓度的等离子体射流。常压室温等离子体(ARTP)是一种以氦射频辉光放电等离子体射流(RF APGD)为核心部件的新型微生物突变系统。RF APGD可以在射频电源驱动的两个水冷裸露金属电极之间产生。工作时，等离子体气体(氦气纯度为99.99％或更高)流经两电极之间的放电区在外部射频电场的作用下将其电离，因此，在下游的等离子喷嘴处便形成了由多种化学性质活泼的粒子组成的非热等离子体射流。RFAPGD中各种化学性质活泼的粒子可以通过破坏碱基与核糖之间的C-N键、碱基上的氨基以及磷酸二酯键的P-O键来改变DNA序列。对ARTP诱变的发明表明，利用ARTP辐照是一种快速、有效、方便、多方位的方法，可以产生具有足够多样性的突变体文库，以改善微生物表型。ARTP诱变机理发明表明，与紫外诱变和化学诱变剂相比，ARTP能引起更强的DNA损伤，从而导致更高的突变率。ARTP已成功应用于细菌、真菌、微藻等100多种微生物的诱变育种中。但是，目前尚未见ARTP应用于海洋观赏鱼诱变育种相关报道。

发明内容

本发明提供了一种ARTP诱变黑公子小丑鱼体色变红的方法，可以有效解决上述问题。

本发明是这样实现的：

一种ARTP诱变黑公子小丑鱼体色变红的方法，包括以下步骤：

S1，采集黑公子小丑鱼受精卵；

S2，对受精卵进行ARTP照射，所述ARTP照射的参数为：射频输入功率为240-320W，氦气流量为8-12L/min，照射距离为1.8-2.2mm，照射时间为3-10min；

S3，将ARTP照射后的受精卵进行孵化后培育成幼鱼，即得体色变红的小丑鱼。

作为进一步改进的，步骤S1中，采集黑公子小丑鱼受精卵为在黑公子小丑鱼产卵受精1h后采集，采集后置于海水中充氧待用。

作为进一步改进的，步骤S3中，所述孵化为：将ARTP照射后的受精卵放置于海水中充氧，水温28-30℃，盐度26-28，pH8.0-8.2，氨氮0.1mg/L，溶解氧≥5.8mg/L，光照周期为12L:12D，光照时间为6:00-18:00，每天换水30％。

作为进一步改进的，步骤S3中，所述培育包括以下步骤：