[发明专利]奥卡西平代谢物的半抗原衍生物、人工抗原和单克隆抗体及其应用、杂交瘤细胞株

说明书

本发明提供了一种奥卡西平代谢物的半抗原衍生物、人工抗原和单克隆抗体及其应用、杂交瘤细胞株，涉及药物监测技术领域。本发明提供的奥卡西平代谢物半抗原衍生物能实现对奥卡西平代谢物10,11‑二氢‑10‑羟基卡马西平（MHD）的特异性识别，偶联载体蛋白得到的MHD人工抗原能够准确获得对MHD的特异性结合能力的抗体。本发明提供的杂交瘤细胞株3C5能够产生高灵敏度等效识别MHD的MHD单克隆抗体，该抗体与MHD‑葡糖苷酸、DHD、奥卡西平、艾司利卡西平醋酸酯、环氧卡马西平、卡马西平和二氢卡马西平无明显的交叉反应，能够高灵敏度等效识别MHD，使其能够应用于制备检测MHD的检测试剂，满足MHD的临床检测要求。

技术领域

本发明属于药物监测技术领域，具体涉及奥卡西平代谢物的半抗原衍生物、人工抗原和单克隆抗体及其应用、杂交瘤细胞株。

背景技术

奥卡西平是一种神经性药物，可用于局限性及全身性癫痫发作，奥卡西平在临床上主要用于对卡马西平有过敏反应者，可作为卡马西平的替代药物应用临床。

10,11-二氢-10-羟基卡马西平（MHD）是奥卡西平的主要活性代谢产物。奥卡西平血药浓度存在较大的个体间和个体内变异，提示血药浓度监测可以在判断奥卡西平疗效、评价治疗效果、规避副反应以及个体化用药方案调整等方面发挥重要作用。采集尿样测定药物浓度的目的与血液不同，尿液中原型药物的测定主要用于药物的剂量回收、尿清除率、体内药物代谢的研究等。

但目前奥卡西平代谢物MHD血药浓度监测在临床实践中开展很少，与MHD血药浓度检测方法繁琐、目前还没有好的免疫学测定方法。此外MHD和卡马西平及其代谢物结构上高度相似。MHD的检测分析主要有LC-MS法（如中国专利CN 110763800 A），但是这类方法满足不了临床高通量、快速准确的检测需求。

建立高灵敏度高特异性的奥卡西平代谢物MHD免疫学检测的前提是获得高质量的抗奥卡西平代谢物MHD抗体，进一步的依赖于奥卡西平代谢物MHD人工抗原的设计和制备。

目前国内外还没有奥卡西平代谢物MHD衍生及抗体制备的专利报道，也没有商品化的奥卡西平代谢物MHD及相应抗体。因此，开发满足MHD的临床检测特异性的奥卡西平代谢物抗体具有重要的意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了奥卡西平代谢物的半抗原衍生物、人工抗原和单克隆抗体及其应用、杂交瘤细胞株。本发明提供的奥卡西平代谢物半抗原衍生物与载体蛋白结合形成的奥卡西平代谢物人工抗原免疫动物后产生的奥卡西平代谢物单克隆抗体能够高灵敏度特异性识别奥卡西平代谢物MHD，满足奥卡西平代谢物的临床检测特异性需求。

本发明提供了一种奥卡西平代谢物半抗原衍生物，具有式I所示结构：

式I。

本发明提供了上述技术方案所述奥卡西平代谢物半抗原衍生物的制备方法，包括以下步骤：

将化合物1、乙醛酸和水混合，在酸性条件下进行醛胺缩合反应，得到化合物2；

将所述化合物2、还原剂和呋喃类溶剂混合，进行还原反应，得到所述奥卡西平代谢物半抗原衍生物；

化合物1化合物2。

本发明提供了一种奥卡西平代谢物人工抗原，由上述技术方案所述的奥卡西平代谢物半抗原衍生物或上述技术方案所述制备方法制得的奥卡西平代谢物半抗原衍生物与载体蛋白共价偶联得到；

所述载体蛋白为具有免疫原性的蛋白质或多肽。

优选地，所述载体蛋白包括血清白蛋、鸡卵清蛋白或牛甲状腺球蛋白。

本发明提供了上述技术方案所述奥卡西平代谢物人工抗原的制备方法，包括以下步骤：