[发明专利]双特异性抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种靶向CD27和Nectin‑4的双特异性的抗体及其用途。抗体包括：第一抗原结合区，所述第一抗原结合区具有CD27结合活性；第二抗原结合区，所述第二抗原结合区具有Nectin‑4结合活性，第一抗原结合区选自CD27单链抗体，第二抗原结合区包括一条Nectin‑4重链和一条Nectin‑4轻链。该抗体可同时与Nectin‑4阳性的肿瘤细胞以及T细胞进行结合，有效介导T细胞杀伤肿瘤细胞，可有效治疗癌症。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地，本发明涉及一种双特异性抗体及其应用，更具体地，本发明涉及一种抗体、核酸分子、表达载体、重组细胞、药物组合物和试剂盒及其用途。

背景技术

癌症是一种严重威胁人类的生命健康的疾病，近年来全球癌症的发生率、死亡率不断上升。目前已有的癌症治疗手段，包括手术切除、放疗、化疗、小分子靶向治疗、抗体靶向治疗、大分子免疫治疗等治疗方法，但上述方法仅在部分癌症患者中发挥有限的作用，癌症仍是困扰人类生命健康的难题。

近年来，双特异抗体成为了免疫治疗中的研究热点。双特异抗体是含有两种特异性抗原结合位点的人工抗体，能够在靶细胞(肿瘤细胞)和效应细胞(免疫细胞)之间架起桥梁，产生导向性杀伤肿瘤的效应功能。

因此，亟需开饭一种用于导向性杀伤肿瘤的双特异性抗体。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。为此，本发明提供了一种靶向CD27和Nectin-4的双特异抗体，该双特异抗体可同时与CD27和Nectin-4进行结合，可有效介导表达CD27的T细胞杀伤表达Nectin-4的肿瘤细胞。

本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

CD27属于NGFR/TNFR基因超家族成员之一，表达于活化的T细胞、B细胞亚群和部分NK细胞。Nectin-4全称为脊髓灰质炎病毒样受体4(PVRL4)，是种I型跨膜蛋白，在人体正常组织(例如皮肤、膀胱、唾液腺、食道、乳房和胃)中低表达，而在癌细胞(例如乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、结直肠癌、食管癌、胃癌、肺癌、肝癌和甲状腺癌)中高表达。此外，有研究表明，Nectin-4在肿瘤的发生、侵袭和转移中起关键作用，Nectin-4过表达可能会促进机体对化疗耐药性。

目前，靶向Nectin-4的抗体药物仅有Padcev获批，Padcev是种抗体偶联药物，由靶向Nectin-4单克隆抗体和阻断微管蛋白聚合的强效抗有丝分裂剂MMAE组成，利用单克隆抗体将化疗药物靶向递送至肿瘤。目前该药物主要用于治疗接受PD-1/PD-L1抑制剂治疗期间或治疗后病情进展的局部晚期患者或转移性尿路上皮癌患者。

基于此，在本发明的一个方面，本发明提出了一种抗体。根据本发明的实施例，所述抗体包括：第一抗原结合区，所述第一抗原结合区具有CD27结合活性；第二抗原结合区，所述第二抗原结合区具有Nectin-4结合活性。根据本发明实施例的抗体可同时与CD27和Nectin-4进行结合，从而有效地介导T细胞对表达Nectin-4的细胞(例如肿瘤细胞)的杀伤作用，尤其是具有较强的肿瘤抑制作用，可有效治疗癌症。

在本发明的另一方面，本发明提出了一种核酸分子。根据本发明的实施例，所述核酸分子编码前述的抗体。根据本发明实施例的核酸分子可编码能同时靶向结合CD27和Nectin-4的抗体。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种表达载体。根据本发明的实施例，携带前述的核酸分子。根据本发明实施例的表达载体导入合适的受体细胞后，可在调控系统的介导下，有效实现前述的抗体的表达，以便大量获得所述抗体。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种制备前述的抗体的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：将前述的表达载体引入到细胞中；将所述细胞在适于蛋白表达和分泌的条件下进行培养处理，以便获得所述抗体。根据本发明实施例的方法可以有效获得上述抗体，具有制备方法简单等优点。