[发明专利]circRNA制备肾脏纤维化诊断试剂中的用途以及诊断设备

说明书

本发明涉及尿液外泌体环状核糖核酸(circRNA)在用于预测肾脏纤维化中的用途，属于医学分子生物学技术领域。本发明发现尿液外泌体中的环状核糖核酸可以用于反映慢性肾脏病进展，并提示肾纤维化程度，通过发掘尿液外泌体中环状核糖核酸的表达，将其结果作为肾纤维化生物标志物。

技术领域

本发明涉及尿液外泌体环状RNA在用于预测肾脏纤维化中的用途，属于医学分子生物学技术领域。

背景技术

慢性肾脏病是中国乃至世界范围内的一个重要公共卫生问题。最近针对中国人的横断面调查显示，慢性肾病的发病率为10.8％[1]。以肾小球硬化和肾小管间质纤维化(TIF)为特征的肾纤维化是终末期肾病的常见病理表现[2]。肾纤维化的诊断是一个长期而艰巨的临床问题。肾活检是目前诊断慢性纤维化的金标准。肾活检是一种有创性检查，可能会导致严重的并发症，如出血、误穿其他脏器等。但在临床实践中，很难进行重复进行肾活检，无法动态监测肾纤维化的发展。到目前为止，还没有无创的检测方法能够准确诊断肾纤维化[3]。近年来，尿液生物标志物引起了广泛关注。Li等人首次建立了尿RNA定量PCR检测方法[4]。微阵列技术的发展使得尿液RNA检测成为研究热点。

References:

[1]Zhang L,Wang F,Wang L,Wang W,Liu B,Liu J,Chen M,He Q,Liao Y,Yu X,Chen N,Zhang J E,Hu Z,Liu F,Hong D,Ma L,Liu H,Zhou X,Chen J,Pan L,Chen W,WangW,Li X and Wang H.Prevalence of chronic kidney disease in China:a cross-sectional survey.LANCET.2012；379:815-22.

[2]Liu Y.Cellular and molecular mechanisms of renal fibrosis.NAT REVNEPHROL.2011；7:684-96.

[3]Wickman L,Afshinnia F,Wang S Q,Yang Y,Wang F,Chowdhury M,Graham D,Hawkins J,Nishizono R,Tanzer M,Wiggins J,Escobar G A,Rovin B,Song P,Gipson D,Kershaw D and Wiggins R C.Urine podocyte mRNAs,proteinuria,and progression inhuman glomerular diseases.J AM SOC NEPHROL.2013；24:2081-95.

[4]Li B,Hartono C,Ding R,Sharma V K,Ramaswamy R,Qian B,Serur D,Mouradian J,Schwartz J E and Suthanthiran M.Noninvasive diagnosis of renal-allograft rejection by measurement of messenger RNA for perforin and granzymeB in urine.N Engl J Med.2001；344:947-54.

发明内容

本发明提供了一种用于诊断肾脏纤维化的标志物，其在患者尿液外泌体中表达下调，能够有效地对样本进行分类和诊断。

对circRNA的表达量进行检测的试剂用于制备肾脏纤维化诊断试剂中的用途，所述的circRNA是指hsa_circ_0036649。

所述的表达量是指尿液外泌体中的表达量。

还包括对尿液外泌体中hsa_circ_0036649的表达量进行检测的步骤。

还包括通过正向引物和反向引物扩增hsa_circ_0036649逆转录产物的步骤。