[发明专利]激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原及其应用

说明书

本发明涉及一种激活TLR‑5的幽门螺旋杆菌融合抗原及其应用，利用该融合抗原可产生能够阻止幽门螺旋杆菌自由运动的鞭毛抗体，还可通过激活TLR‑5信号通路，增强了B细胞产生抗体的能力，提高抗体效价。

技术领域

本发明涉及一种激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原及其应用。

背景技术

幽门螺旋杆菌（ Helicobacter pylori，Hp）是一种伴随人类进化的革兰阴性细菌。目前，治疗幽门螺旋杆菌感染是联合应用抗生素。但是，即使用抗生素清除感染者胃内的幽门螺旋杆菌后，还会再次感染。反复感染，反复用药，将导致肠道菌群失调，还容易引起细菌耐药，使治疗效果和清除率显著降低。如果所有患者都服用抗生素治疗，大量患者排泄出的抗生素也容易导致环境其它耐药菌株的出现。为了解决上述问题，前期我们用抗体牛乳治疗幽门螺旋杆菌感染，通过临床试验，取得了较好的清除效果。

TLRs（Toll like receptors，TLRs）是迄今认识的第一类，并且是被认为最重要的天然免疫识别受体，能够识别各种与免疫相关的微生物配体，被称为识别病原体“感受器”。TLRs在天然免疫防御中起重要作用，同时也能调节适应性免疫，是连接天然免疫和适应性免疫的桥梁。目前发现的TLRs成员有TLR1-11，表达于除骨髓细胞以外的多种类型的细胞。TLRs可通过激活NF-κB途径上调DC和B细胞的MHC-I/II、CD80和CD86分子的表达，提高了DC和B细胞的抗原提呈能力，从而增强了激活CD4⁺Th的能力，激活的CD4⁺Th反过来又可以增强B细胞分泌产生抗体的能力。此外，TLRs的信号通路的激活可上调滤泡B细胞的BCR信号通路和滤泡辅助T细胞（Tfh）CD40信号通路的激活，增强了生发中心的B细胞进一步分化为长寿浆细胞或记忆B细胞的能力。由于浆细胞也表达大量TLRs，浆细胞TLRs信号通路的激活也可增强其产生抗体的能力。因此，为了提升疫苗的免疫效果，先进的疫苗设计需要充分考虑TLRs的作用。

幽门螺旋杆菌拥有4~8条单极鞭毛，运动活泼，可帮助细菌迅速穿过黏稠的黏液层到达黏膜表面并在粘液层运动，同时帮助细菌逃避胃酸的杀菌作用。抗幽门螺旋杆菌鞭毛蛋白抗体可以阻止细菌自由运动，细菌因此不能逃避胃酸的杀菌作用。幽门螺旋杆菌的鞭毛蛋白可被TLR-5所识别，由于人B细胞不表达TLR-5，由此降低了人体对幽门螺旋杆菌的免疫清除作用，是幽门螺旋杆菌能在人体胃内持续存在的原因之一。

发明内容

本发明的目的是提供一种可阻止幽门螺旋杆菌自由运动的鞭毛抗体，通过激活TLR-5信号通路，增强了B细胞产生抗体的能力，提高抗体效价的激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原及其应用。

本发明采用如下技术方案：

一种激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原，其包括如SEQ ID No.1所示氨基酸序列。

一种编码上述激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原的核酸分子，其包括如SEQ IDNo.7所示的核苷酸序列。

一种包含上述核酸分子的载体。

一种包含上述核酸分子的基因工程菌。

一种利用激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原制备的多克隆抗体。

一种利用激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原制备的疫苗。

一种激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原在制备刺激奶牛的免疫应答反应的奶牛疫苗中的应用。

一种利用激活TLR-5的幽门螺旋杆菌融合抗原制备的免疫牛乳。