[发明专利]芫花根中分离的愈创木烷型倍半萜类化合物及其制备方法和应用

说明书

芫花根中分离的愈创木烷型倍半萜类化合物及其制备方法和应用，属于医药技术领域，具体涉及从瑞香科瑞香属植物芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)根中提取分离的13个愈创木烷型倍半萜类化合物，具有相同的愈创木烷型倍半萜母核，所述化合物具有良好的乙酰胆碱酯酶抑制活性，具有抗阿尔兹海默症的医药用途。本发明制备方法简单易行，重现性好，纯度高。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及从植物芫花根中制备的愈创木烷型倍半萜类化合物及其制备方法，以及这类化合物在抗阿尔兹海默症方面的应用。

背景技术

芫花根属于瑞香科(Thymelaeaceae)瑞香属植物芫花(Daphne genkwa Sieb.etZucc.)的根部，是一味常用中药，其具有悠久的入药历史，性温，味辛、苦，平，有毒，有清热解毒，止咳平喘，消肿利尿之功效，分布于长江流域各省与黄河流域部分地区。常用于痈疮肿毒、荨麻疹、水肿、风湿性及类风湿性关节炎等疾病的治疗。药理学研究表明芫花根具有一定的抑菌作用、抗炎作用、神经保护活性、抗肿瘤作用，碳酸溶解部分对动物子宫有明显的兴奋作用。

随着全球人口老龄化加重，神经退行性疾病受到较多的关注，阿尔茨海默氏症和帕金森症等成为导致中老年人死亡的主要杀手。近年来研究表明，抑制乙酰胆碱酯酶可以延缓神经退行性疾病的进程，同时能够防止神经元发生病变，对于治疗神经退行性疾病有着很好的前景。

发明内容

本发明的目的在于提供13种从瑞香科瑞香属植物芫花[Daphne genkwa Sieb.etZucc.]根中分离得到的愈创木烷型倍半萜类化合物，结构如下所示：

所述愈创木烷型倍半萜类化合物是从芫花根中提取分离得到，所述芫花根是指瑞香科瑞香属植物芫花的干燥根皮。

本发明所述愈创木烷型倍半萜类化合物的制备方法，包括如下步骤：

取干燥的芫花根以70％-80％工业乙醇提取，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用乙酸乙酯萃取，并将所得组分经硅胶柱色谱，以二氯甲烷-甲醇系统100:0-0:100进行等度梯度洗脱，共收集到三个流份A-C。

流份B经HP20柱色谱，以乙醇-水系统0:100-100:0进行梯度洗脱，得四个组分B1、B2、B3和B4。利用ODS柱色谱将组分B1以乙醇-水系统10:90-90:10进行梯度洗脱，得五个组分a-e。

所得组分b经硅胶柱色谱以石油醚-乙酸乙酯系统100:1-10:1在TLC分析的基础上得到四个亚组分b1-b4。

在制备性反相高效液相色谱上使用甲醇-水(70:30，v/v)的流动相来分离b1和b2得到化合物1-13。

上述制备方法中，所述提取为回流提取，提取2-3次，每次2-3小时。

所述芫花根为瑞香科瑞香属植物芫花[Daphne genkwa Sieb.et Zucc.]的根。

所得化合物经过系统结构鉴定结果如下：

利用高分辨质谱，一维NMR、二维NMR、计算ECD及NMR技术对化合物1-13的结构鉴定(如图1-26)。

daphnegenol A(1):黄色油状物(甲醇)，易溶于甲醇、DMSO等溶剂。(c0.10MeOH)，HRESIMS给出准分子离子峰m/z 289.1415[M+Na]⁺(calcd.for C₁₅H₂₂O₄Na289.1410),结合¹H和¹³C NMR确定其分子式为C₁₅H₂₂O₄，计算其不饱和度为5。