[发明专利]一种产β-榄香烯的工程菌及应用

权利要求书

1.一种重组菌，其特征在于为体内含有或表达异戊烯基焦磷酸IPP和二甲基烯丙基焦磷酸DMAPP生物合成途径相关酶基因以及法尼基焦磷酸合成酶，莴苣来源的吉马烯A合成酶基因突变体。

2.如权利要求1所述一种重组菌，其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶基因的编码基因的核苷酸序列为SEQ.ID NO.1所示。

3.如权利要求1或2所述一种重组菌，其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶突变体是将莴苣来源的吉马烯A合成酶氨基酸序列中第229位、第243位、第364位、第392位、第410位中至少一个进行定点突变。

4.如权利要求3所述一种重组菌，其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶突变体是将莴苣来源的吉马烯A合成酶氨基酸序列中第364位的I突变为K和第410位的T突变为S。

5.一种重组基因工程菌，其特征在于由莴苣来源的吉马烯A合成酶编码基因构建的重组载体、pBbA5c-MM重组载体转化至大肠杆菌E.coli BL21(DE3)star中得到；

所述莴苣来源的吉马烯A合成酶编码基因构建的重组载体由莴苣来源的吉马烯A合成酶突变体与pET28a载体连接得到。

6.如权利要求5所述一种重组基因工程菌，其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶基因的编码基因的核苷酸序列为SEQ.ID NO.1所示。

7.如权利要求5或6所述一种重组基因工程菌，其特征在于其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶突变体是将莴苣来源的吉马烯A合成酶氨基酸序列中第229位、第243位、第364位、第392位、第410位中至少一个进行定点突变。

8.如权利要求7所述一种重组基因工程菌，其特征在于所述莴苣来源的吉马烯A合成酶突变体是将莴苣来源的吉马烯A合成酶氨基酸序列中第364位的I突变为K和第410位的T突变为S。

9.如权利要求5-8任一项所述重组基因工程菌在制备吉马烯A及β-榄香烯中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于如权利要求5-8任一项所述重组基因工程菌在SBMSE培养基中至OD₆₀₀＝0.6-1.0,加入IPTG后诱导培养，获得含有吉马烯A的培养液，采用正十二烷覆盖收集挥发性吉马烯A产物，经高温转化后生成β-榄香烯。