[发明专利]羰基还原酶突变体及其在环戊二酮类化合物还原中的应用

权利要求书

1.一种羰基还原酶突变蛋白，其特征在于，所述的突变蛋白为非天然蛋白，且所述突变蛋白具有催化环戊二酮类化合物生成环戊酮醇化合物的催化活性，并且所述突变蛋白在野生型的羰基还原酶的对应于SEQ ID NO.:1的选自下组的与酶催化活性相关的核心氨基酸发生突变：

第91位异亮氨酸(I)；

第187位异亮氨酸(I)；

第188位异亮氨酸(I)；和

第205位苯丙氨酸(F)。

2.如权利要求1所述的突变蛋白，其特征在于，所述羰基还原酶来源于Ralstonia sp.。

3.一种多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码权利要求1所述的突变蛋白。

4.一种载体，其特征在于，所述的载体含有权利要求3所述的多核苷酸。

5.一种宿主细胞，其特征在于，所述的宿主细胞含有权利要求4所述的载体，或其基因组中整合有权利要求3所述的多核苷酸。

6.一种产生权利要求1所述的羰基还原酶的突变蛋白的方法，其特征在于，包括步骤：

在适合表达的条件下，培养权利要求5所述的宿主细胞，从而表达出羰基还原酶的突变蛋白；和/或

分离所述羰基还原酶的突变蛋白。

7.一种酶制剂，其特征在于，所述酶制剂包含权利要求1所述的羰基还原酶的突变蛋白。

8.一种制备环戊酮醇化合物的方法，其特征在于，包括步骤：

(i)将权利要求1所述的羰基还原酶的突变蛋白与反应底物接触，进行催化反应，从而获得所述环戊酮醇化合物；和

(ii)任选地，分离并纯化所述环戊酮醇化合物。

9.一种权利要求1所述的突变蛋白的用途，其特征在于，所述的突变蛋白用于催化环戊二酮类化合物生成环戊酮醇化合物，或被用于制备催化环戊二酮类化合物生成环戊酮醇化合物的催化制剂。

10.一种权利要求1所述的突变蛋白或权利要求5所述的宿主细胞的用途，其特征在于，用于制备环戊酮醇化合物。