[发明专利]基于环介导等温扩增技术检测猴痘病毒的组合物及其应用在审

申请号：	202210805992.X	申请日：	2022-07-08
公开（公告）号：	CN115927742A	公开（公告）日：	2023-04-07
发明（设计）人：	王频艺;纪博知;刘佳;戴立忠	申请（专利权）人：	圣湘生物科技股份有限公司
主分类号：	C12Q1/70	分类号：	C12Q1/70;C12N15/11;C12Q1/6844;A01N1/02;C12R1/93
代理公司：	北京派特恩知识产权代理有限公司 11270	代理人：	朱磊;张颖玲
地址：	410205 湖南省长沙***	国省代码：	湖南;43
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摘要：
搜索关键词：	基于环介导等温扩增技术检测痘病毒组合及其应用
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【权利要求书】：

1.一种基于环介导等温扩增技术检测猴痘病毒的试剂组合，其特征在于，包括第一组合物：

MPV-F3：ATCCATTGTCGTAGACCAA(SEQ ID NO:1)

MPV-B3：AGTTGCGTTAGTTCTCTCT(SEQ ID NO:2)

MPV-FIP：GGAGAAGCGAGAAGTTAATAAAGCT

-CGTTGGAGCTGTAAACCA(SEQ ID NO:3)

MPV-BIP：GTACAGCAGTAGCTCCTTAGTCC

-GATCTATATTGACGAGCGTTC(SEQ ID NO:4)

MPV-LF：CTGTATGATCTTCAACGTAGTGCTA(SEQ ID NO:5)

MPV-LB：TTAATAACCGCACACAATCTCTGTG(SEQ ID NO:6)。

2.根据权利要求1所述的试剂组合，其特征在于，所述试剂组合还包括第二组合物，其中，所述第二组合物包括细胞保存液。

3.根据权利要求2所述的试剂组合，其特征在于，所述细胞保存液包括：

Tris HCl的终浓度为20～150mM；Triton–100体积/体积比终浓度为0.05～2％；吐温20体积/体积终浓度为0.01～0.2％；NaCl的终浓度为10～100mM；氯化铵终浓度为10～100mM；氯化锂终浓度为20～200mM；焦磷酸钠终浓度为50～100mM；二硫苏糖醇质量/体积终浓度为0.01～1％；Proclin 300终浓度为0.01％；所述细胞保存液pH值8～9。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的试剂组合在制备检测猴痘病毒的试剂盒中的用途。

5.根据权利要求1～3中任一项所述的试剂组合在制备一步法检测猴痘病毒的试剂盒中的用途。

6.一种检测猴痘病毒的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括根据权利要求1～3中任一项所述的试剂组合。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、dUTP、Bst酶、尿嘧啶-N-糖基化酶、LAMP缓冲液、荧光核酸染料SYTO-9、以及Mg²⁺中的至少一种。

8.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阴性质控品和阳性质控品。

9.一种用于以非诊断目的检测猴痘病毒的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)使用如权利要求1～3任一项所述的试剂组合对待测样本进行恒温扩增并分析；

2)获得并分析结果。

10.一种用于以非诊断目的检测猴痘病毒的方法，其特征在于，使用如权利要求2～3中任一项所述的试剂组合检测猴痘病毒，所述方法包括以下步骤：

1)使用第二组合物释放待测样本的核酸；

2)使用第一组合物对步骤1)获得的核酸进行恒温扩增并分析；

3)获得并分析结果。