[发明专利]一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法及其CRP抗体偶联物制备与应用

权利要求书

1.一种大规模合成、干燥金属复合纳米粒子的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A)将Na₂PdCl₄溶液、HAuCl₄溶液和去离子水混合后加入氨水溶液混合搅拌，得到反应液；

B)向所述反应液中加入FeCl₂溶液混合搅拌，通过自氧化还原组装法合成金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液；

C)将所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液与PAA溶液混合，进行反应，得到反应产物；

将得到的反应产物离心后干燥，得到干燥的GPIO-PAA NPs。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤A)中，所述HAuCl₄溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；

所述Na₂PdCl₄溶液的浓度为0.01～0.1mol/L；

所述氨水溶液的质量浓度为0.01％～0.5％；

所述加入氨水溶液混合搅拌的时间为1～10min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B)中，所述FeCl₂溶液的浓度为0.05～1mol/L；

所述加入FeCl₂溶液混合搅拌的时间为10～60min。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤C)中，以Fe计，所述金、钯、氧化铁复合纳米粒子(GPIO NPs)溶液的浓度为1～100ppm；

所述PAA溶液的质量浓度为1％～20％；

所述反应的时间为1～5h；

所述干燥的方法为冷冻干燥。

5.一种如权利要求1～4任意一项所述的方法制备得到的干燥的GPIO-PAA NPs。

6.一种dAb-GPIO NPs偶联物，其特征在于，由dAb与权利要求5所述的GPIO-PAA NPs制备得到。

7.一种如权利要求6所述的dAb-GPIO NPs偶联物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将干燥的GPIO-PAA NPs分散于2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲溶液中，加入1-乙基-(3-二甲氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和羟基硫代琥珀酰亚胺钠盐，搅拌反应，得到反应液；

向所述反应液中加入CRP单克隆抗体dAb进行反应后，再加入BSA封闭，得到dAb-GPIONPs偶联物。

8.一种如权利要求6所述的dAb-GPIO NPs偶联物在CRP检测中的应用。

9.一种用于CRP抗原检测的免疫层析试纸条，其特征在于，包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，其中所述检测线包被有用于捕获CRP的CRP单克隆抗体(cAb)，所述质控线包被有羊抗鼠IgG，所述结合垫包括权利要求6所述的dAb-GPIO NPs偶联物。

10.一种采用权利要求9所述的用于CRP抗原检测的免疫层析试纸条检测CRP抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将待测样品滴加于试纸条表面后，如果待测样品中含有CRP抗原，在检测线处产生有颜色变化的线条，线条颜色深度与抗原浓度呈正相关，并可通过扫描灰度获取比色信号进行定量分析。