[发明专利]一种用于超微量核酸全自动提取的纳米硅羧基磁珠的制备方法及应用

权利要求书

1.一种用于超微量核酸全自动提取的纳米硅羧基磁珠的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，超顺磁性甘油修饰的Fe₃O₄纳米颗粒的制备：配置0.5mol/L的可溶性三价铁离子盐加入到乙二醇溶液中，搅拌均匀后加入CH₃COONa·3H₂O至体系PH为中性，然后将该混合溶液倒入密闭容器中，在150～300℃条件下反应6～12h，冷却至室温后，磁分离出黑色沉淀，用去离子水反复洗涤沉淀物数次，-10℃冷冻干燥12h，得到超顺磁性甘油修饰的Fe₃O₄纳米颗粒；加入无水乙醇，得到纳米磁珠无水乙醇混合液；超声振荡纳米磁珠无水乙醇混合液25～35分钟后，加入硅烷化试剂，室温下搅拌6～8小时，磁分离，即得到硅基包被磁珠;

步骤二，制备Fe₃O₄-SiO₂-COOH纳米硅羧基磁珠：取上述步骤一中获得的的硅基包被磁珠2g及羟基丁二酸2g 于100 ml 的水溶液中90℃充分搅拌反应2小时，用双蒸水洗至PH中性,并真空干燥，获得Fe₃O₄/SiO₂-COOH纳米硅羧基磁珠。

2.根据权利要求1所述用于全自动核酸提取的纳米硅羧基磁珠的制备方法，其特征在于，所述步骤一中加入的硅烷化试剂为APTES,SELECTRA-SIL试剂。

3.根据权利要求1所述用于全自动核酸提取的纳米硅羧基磁珠的制备方法制得的磁珠，其特征在于Fe₃O₄-SiO₂-COOH纳米硅羧基磁珠的饱和磁化强度可达77.6 emu/g。

4.根据权利要求1所述用于全自动核酸提取的纳米硅羧基磁珠的制备方法，其特征在于，获得的Fe₃O₄/SiO₂-COOH纳米硅羧基磁珠为核壳结构，包括Fe₃O₄纳米颗粒内核，SiO₂壳层，SiO₂外壳层包覆在多个Fe₃O₄纳米颗粒外表面，Fe₃O₄纳米颗粒外表面附带羟基，共三层结构。

5.根据权利要求1-4任一所述的纳米硅羧基磁珠的应用，其特征在于，可以适配全自动核酸提取仪，用于全自动提取多种样本来源的超微量核酸，可应用于全血、血清、唾液、新鲜动物组织等生物检材中的核酸提取及纯化。