[发明专利]非小细胞肺癌miRNA标志物及其应用

说明书

本发明提供了非小细胞肺癌miRNA标志物及其应用，涉及生物医学技术领域。所述标志物至少包括miR‑3149；优选地，所述miRNA标志物包括miR‑3149和miR‑6803‑5p的组合。本发明提供的miRNA标志物在非小细胞肺癌人群与健康人群中的表达量存在显著差异，miR‑3149可单独或与miR‑6803‑5p组合作为标志物用于临床非小细胞肺癌的检测或辅助诊断。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，尤其是涉及非小细胞肺癌miRNA标志物及其应用。

背景技术

在我国，肺癌发病率居恶性肿瘤的首位，大多数肺癌患者发现时已经为晚期，失去了手术治疗机会，其5年存活率仅为15-20％，而早期肺癌患者的5年生存率达40％左右。因此，早期发现和早期治疗对于提高肺癌患者的生存率至关重要。由于缺乏有效的早期诊断方法，在过去的几十年中，NSCLC患者的存活率没有显著提高。

目前，肺癌检测和筛查的手段主要是通过X胸片、核磁共振成像和低剂量螺旋CT等影像学诊断筛查，然而，这2种筛查手段的特异性和准确性并不太理想。

微小RNA(microRNA，miRNA)是一类内源性高度保守的长度为18-25个核苷酸的非编码单链小分子RNA，主要通过转录后机制调控靶基因的翻译或表达，从而在肿瘤的发生、发展中有致癌和抑癌miRNA的不同作用。miRNA非常稳定地存在于人类血浆和血清中，并且能够抵抗RNA内切酶的降解，可作为诊断肺癌的新的血清标志物指标。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供非小细胞肺癌miRNA标志物及其应用，为非小细胞肺癌的特异性检测或辅助诊断提供新的途径和方法。

本发明提供的技术方案如下：

在一个方面，本发明提供了非小细胞肺癌miRNA标志物，所述miRNA标志物至少包括miR-3149；优选地，所述miRNA标志物包括miR-3149和miR-6803-5p的组合。在一个实施方案中，所述miRNA标志物由miR-3149和miR-6803-5p组成。

本发明所述miRNA(miR-3149和/或miR-6803-5p)的序列为已知序列，在数据库miRBase中可获得其相应的序列。

本发明发现外周血miRNA标志物(miR-3149和/或miR-6803-5p)在诊断为非小细胞肺癌患者的外周血中的表达与在对照样本中的表达相比显著上调；首次提出诊断标志物miR-3149可用于人群中非小细胞肺癌的检测或诊断的标志物，其不仅在非小细胞肺癌人群与健康人群中的表达量存在显著差异，而且在非小细胞肺癌中的敏感性可达到79.5％，可靠性高。

在一个优选的实施方案中，所述miRNA标志物为血清miRNA标志物。

在另一个方面，本发明提供了所述非小细胞肺癌miRNA标志物在用于制备检测和/或诊断非小细胞肺癌的试剂盒中的应用。miR-3149可单独或与miR-6803-5p组合作为标志物用于临床非小细胞肺癌的检测或辅助诊断，因此，其可用于制备检测和/或诊断非小细胞肺癌的试剂盒。

在另一个方面，本发明提供了检测所述miRNA标志物的产品在制备用于检测和/或诊断非小细胞肺癌的试剂盒中的应用。具体地，检测所述miRNA标志物的产品为能够检测所述miRNA标志物的表达和/或转录的产品。

在一些具体的实施方案中，检测所述miRNA标志物的产品为适用于如下方法的试剂：通过使用qRT-PCR、数字PCR、荧光染料法、印记杂交、原位杂交、阵列杂交、基因芯片或新一代测序来检测表达水平的试剂。在本发明中，使用适用于检测生物样品中的RNA表达水平的任意技术可以测量样品中miRNA的表达水平。用于测定生物样品(细胞、组织、体液)中RNA表达水平的合适技术是本领域技术人员众所周知的。