[发明专利]一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备及其应用

权利要求书

1.一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌的制备方法，其特征在于，

1）提取D. agitata CKB的基因组；

2）以D. agitata CKB的基因组DNA为模板，参考pRADK载体的序列，设计出一对用于同源重组的引物，并利用该引物对扩增得到含cld、pcrA、pcrB、pcrC和pcrD的目标脱氯基因；

3）对pRADK载体进行线性化；

4）将目标脱氯基因重组至线性化后的pRADK载体上；

5）将启动子P1（如SEQ ID NO.6所示）插入至基因cld前；将启动子P2（如SEQ ID NO.7所示）插入至基因cld与pcrA之间；将启动子P3（如SEQ ID NO.8所示）插入至基因pcrA与pcrB之间；将启动子P4（如SEQ ID NO.9所示）插入至基因pcrB与pcrC之间；将启动子P5（如SEQID NO.10所示）插入至基因pcrC与pcrD之间；

6）获得质粒pRADP1-P2-P3-P4-P5-agitata，并转入耐辐射奇球菌D. radiodurans R1的感受态，得到一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌称为DR-agitata。

2.根据权利要求1所述的制备方法得到一种降解高氯酸盐的抗辐射细菌，其特征在于，耐辐射奇球菌D. radiodurans R1的感受态通过吸收插入了脱氯基因和各个启动子的质粒pRADP1-P2-P3-P4-P5-agitata，从而同时具有降解高氯酸盐和抗辐射能力。

3.根据权利要求2所述的抗辐射细菌的应用，其特征在于，用于高氯酸盐降解的体系为：5 mg/L~100 mg/L ClO₄^-，50 mg/L~1000 mg/L乙酸钠，40 μg/mL氯高铁血红素。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，高氯酸盐降解体系的温度范围为16 ℃~42℃。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，高氯酸盐降解体系的最适反应温度为30℃。

6.根据权利要求2所述的抗辐射细菌，其特征在于，用于降解高辐射区的高浓度高氯酸盐。

7.根据权利要求2所述的抗辐射细菌，其特征在于，可用于改良火星表面土壤。