[发明专利]一种基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法在审

专利信息
申请号: 202210735526.9 申请日: 2022-06-26
公开(公告)号: CN115161259A 公开(公告)日: 2022-10-11
发明(设计)人: 杨奕;郑晶晶 申请(专利权)人: 武汉大学深圳研究院
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071;C12N5/09;C12N5/00
代理公司: 广东德而赛律师事务所 44322 代理人: 柴吉峰
地址: 518057 广东省深圳市南山区科*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 声学 气泡 阵列 体外 快速 三维 肿瘤 球类 器官 构建 方法
【权利要求书】:

1.一种基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,包括如下步骤:

a):制备PDMS芯片,并粘合到玻璃基板上备用;

b):将培养的细胞浓缩重悬到GelMA水凝胶溶液中;

c):将步骤b获得的细胞溶液注入到PDMS芯片中,形成球状气泡阵列,在声学信号作用下细胞旋转聚集成球并附着在球状气泡上,在紫外光源辐照下成胶,快速构建出体外三维肿瘤球类器官。

2.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,PDMS芯片具有侧腔阵列,侧腔与主沟道的角度为23°。

3.根据权利要求2所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,PDMS中注入液体,侧腔会截留空气。

4.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,步骤b中培养的细胞是乳腺癌细胞。

5.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,水凝胶溶液中的GelMA含量为5wt%-10wt%。

6.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,步骤b中细胞浓缩后的浓度为6×106个/mL。

7.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,步骤c中声学信号由压电陶瓷片产生,频率为28-36KHZ,施加的电压为12.6Vpp。

8.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,步骤c中气泡阵列包括6行,每行七个独立的单元,总共42个单元。

9.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,声学信号引起球状气泡的一阶振荡,球状气泡的一阶振荡引起流体的二阶振荡,产生二次声辐射力,步骤c中细胞受二次声辐射力作用,15秒内旋转聚集成紧密的球体,球体直径为30-300μm。

10.根据权利要求1所述基于声学气泡阵列的体外快速三维肿瘤球类器官构建方法,其特征在于,步骤c中紫外光辐照时间为15-60s,细胞球体封装在水凝胶里,水凝胶模拟肿瘤微环境。

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