[发明专利]B7-H3基因抑制剂在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用

说明书

本发明公开了B7‑H3基因抑制剂在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。本发明发现B7‑H3基因抑制剂具有抗肿瘤活性作用，可有效抑制NSCLC细胞细胞迁移能力；木犀草素可抑制非小细胞肺癌细胞生长、增殖能力和抑制非小细胞肺癌细胞的单细胞克隆形成能力；木犀草素与B7‑H3基因抑制剂具有潜在抗肿瘤活性协同作用，木犀草素作用与B7‑H3及p‑EGFR蛋白的表达有关，为开发非小细胞肺癌治疗药物提供一定的依据和参考。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及B7-H3基因抑制剂在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。

背景技术

肺癌起源支气管黏膜或腺体病变，在致癌因子作用下，支气管上皮细胞发生DNA损伤，致癌基因(如Ras基因)被激活，抑癌基因(如p53基因)被抑制，细胞突变导致肺癌的发生。世界卫生组织(World Health Organization，WHO)将肺癌分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌(Non-small Cell Lung Cancer，NSCLC)。NSCLC包括肺腺癌、鳞状上皮细胞癌和大细胞癌。

针对NSCLC的临床治疗有：有创开胸手术、放疗、化疗、靶向治疗及免疫治疗等，或多手段联合方案。近年来，免疫治疗已然成为热点，免疫治疗旨在激活，增强自身免疫系统，杀灭肿瘤细胞与组织。免疫检查点(Immune Checkpoint，IC)即程序性死亡受体及配体，肿瘤细胞可以利用IC抑制机体免疫系统，降低自我调节能力从而实现免疫逃逸。免疫检查点抑制剂(Immune Checkpoint Inhibitor，ICI)通过抑制IC的受体、配体结合，从而提高免疫系统的识别能力和攻击性，阻止肿瘤细胞发生免疫逃逸。因此ICI是肿瘤免疫治疗的热点。

研究发现，不同B7族基因靶点分子在免疫细胞反应调节中，有起激活或抑制的共刺激信号与免疫检查点，如PD-1、PD-L1、PD-L2和CTLA4具有多种受体-配体相互作用，可以帮助NSCLC细胞实现免疫逃逸，促进增殖。相关单克隆抗体(Monoclonal Antibody，MAbs)可下调抑制性免疫反应，并促进T细胞的细胞毒性，从而清除癌细胞。相较于传统治疗，生存时间明显延长。B7蛋白家族是表达在APC膜上的一种免疫球蛋白超家族，家族成员中不同蛋白具有积极、消极或双重调节功能，向T细胞传递激活或抑制信号。最早的B7家族蛋白是B7-1(CD80)和B7-2(CD86)，与CD28结合激活T细胞。

木犀草素(Luteolin)是存在于如金银花、菊花等常见黄酮类化合物。其具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒等药理活性；有研究报道木犀草素是一个有潜力的抗肿瘤活性化合物，但目前仅有理论研究而临床研究较少，其对非小细胞肺癌的作用还未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本申请提供B7-H3基因抑制剂在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用，探索B7-H3基因靶点和天然化合物木犀草素抗非小细胞肺癌(NSCLC)活性，探讨木犀草素对NSCLC细胞体外增殖和迁移能力以及相关蛋白表达的影响，为开发非小细胞肺癌治疗药物提供一定的依据和参考。

为达上述目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供B7-H3基因抑制剂在制备治疗非小细胞肺癌药物中的应用。

本发明中，选择三种典型NSCLC细胞(A549细胞、PC9细胞、H1703细胞)，并抑制其中B7-H3基因的表达，以及进行B7-H3基因过表达处理作为对照，发现通过抑制NSCLC细胞中B7-H3基因表达能够有效抑制NSCLC细胞细胞迁移能力，具有抗肿瘤活性作用。

优选地，所述B7-H3基因抑制剂包括以B7-H3基因为靶标制备或筛选得到的对B7-H3基因具有抑制效果的分子或制剂。

优选地，所述B7-H3基因抑制剂为核酸分子、核酸构建体、慢病毒、抗体或小分子化合物。

优选地，所述核酸分子包括双链RNA、siRNA或shRNA中任意一种或至少两种的组合。