[发明专利]含有ADCY8基因用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒及其应用

权利要求书

1.用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒，其特征在于，所述用于检测ADCY8基因的SNP位点为g.48366302。

2.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒，其特征在于，ADCY8基因的SNP位点g.48366302等位基型因包括CC、CT和TT。

3.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒通过以下共建体系建成获得：

(1)根据新疆驴ADCY8基因的SNP位点g.48366302，自行人工设计特异性引物；

(2)PCR反应试剂：2×KASP Mix、上下游引物、DNA模板和水。

4.如权利要求2所述用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒，其特征在于，所述的特异性引物序列如下所示：

上游引物1：5'-GAAGGTCGGAGTCAACGGATTTTCCAAACTTTATCACTTCTACTTTGT-3'；

上游引物2：5'-GAAGGTGACCAAGTTCATGCTTCCAAACTTTATCACTTCTACTTTGC-3'；

下游引物1：5'-AGTCAACATCATTCTCAAGTTCTAGC-3'。

5.如权利要求1所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒的应用，其特征在于，所述试剂盒的应用中，通过检测方法体现，具体包括如下步骤：

(1)利用装有枸橼酸钠抗凝剂的采血管，活体采集新疆驴颈静脉血5ml，-20℃保存；提取基因组DNA，-20℃保存待用；

(2)采用步骤(1)总共提取获得的新疆驴基因组DNA进行，ADCY8基因PCR扩增，根据设计的引物，利用权利要求1或2任意一项提供的试剂盒特异性扩增ADCY8基因；PCR反应体系为，2×KASP Mix 5μL，100μM上游引物10.015μL，100μM上游引物20.015μL，100μM下游引物0.04μL上下游引物各0.07μL，基因组DNA 2μL，ddH₂O补充至10μL；反应条件为，94℃起始步骤，1个循环10min；94℃10个循环20s；61℃45s；94℃35个循环20s；55℃20s；

(3)基于步骤(2)中扩增获得的产物进行KASP分型：基于引物末端碱基的特异匹配来对SNP分型，利用Douglas平台，对SNP进行双等位基因判断，从而进行基因分型。

6.如权利要求2或5任意一项所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒在产奶量高的新疆驴的选育中的应用。

7.如权利要求2或5任意一项所述的用于筛选新疆驴泌乳性状的试剂盒在乳脂率和蛋白率相对较高的新疆驴的选育中的应用。