[发明专利]ESI-09在防治SVCV感染中的应用

说明书

本发明公开了ESI‑09在防治鱼类鲤春病毒血症病毒（Spring viraemia of carp virus，SVCV）感染中的应用，细胞感染模型的建立显示，ESI‑09能够对SVCV感染细胞起到显著的保护作用，结合qPCR实验及Western Blot实验结果显示，ESI‑09处理后SVCV在转录及蛋白表达水平均被清除。此外，ESI‑09处理使被SVCV诱导表达的宿主免疫基因恢复至正常水平。因此，ESI‑09能够作为防治SVCV感染的药物，并具有使用剂量小，保护效果佳的优点。

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及ESI-09的用途，可用于制备预防和治疗SVCV感染的药物。

背景技术

ESI-09是一种特定的环腺苷酸结合蛋白(exchange protein directlyactivated by cAMP，EPAC)抑制剂。EPAC是细胞内重要第二信使cAMP的效应分子，能够通过EPAC-Rap1信号通路介导cAMP传递的信号，调节细胞增殖、炎症反应、离子转运、基因表达或者细胞粘附和迁移等多种生理活动。目前，研究表明EPAC在促进肿瘤细胞的增殖、粘附、转移的过程中发挥重要功能，ESI-09则作为EPAC的特异性拮抗剂，能够特异性阻断EPAC介导的Rap1活化和Akt磷酸化，起到抑制肿瘤细胞增殖的作用。目前，对于ESI-09的研究多集中于抗癌及抗细菌功能，而其在抗病毒方面的功能尚未见报道，尚未见有将ESI-09应用于水生病毒防治的实例。

鲤春病毒血症病毒(Spring viraemia of carp virus，SVCV)属弹状病毒科，水疱病毒属，是一种单股负义链RNA病毒。SVCV引起的鲤春病毒血症(SVC)是一种具高传染性，高致死性的水产疾病，能够造成鲤科鱼类大量死亡，形成巨大的经济损失。目前，SVCV的结构及遗传多样性已有较多研究和报道。同样地，SVCV的致病机理被发现包括影响细胞凋亡，造成氧化应激损伤，针对免疫系统实现免疫逃逸等。

尽管SVCV的研究较为丰富，药物研究较多，仍然缺乏行之有效的防治手段，尚无商品化的特效药。目前，研究人员尝试使用新手段治疗SVCV的感染，例如利用RNA干扰诱导病毒基因表达的沉默，但是，该方式具有成本较高，干扰RNA保存困难的缺点。另外，SVCV的疫苗开发目前尚处于探索阶段，包括灭活疫苗、弱毒疫苗、核酸疫苗和亚单位疫苗等。但尚未研发出保护率、成本、接种方式三项均满足规模化生产，能够实现市场投放的疫苗。因此，在当前的研究背景下，寻找高效安全的药物作为SVCV的防治手段仍然是首选。

发明内容

本发明的目的在于提供ESI-09在防治SVCV感染中的应用，ESI-09能够显著抑制鱼类离体培养细胞中SVCV病毒相关基因(包括g，l，m，n，p)的转录，抗病毒实验证实ESI-09对于SVCV感染起到保护作用，ESI-09能够用于制备防治SVCV感染的药物。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

ESI-09在防治SVCV病毒感染中的应用：在本发明的具体实施例中，感染SVCV的EPC细胞系在加入20μM ESI-09处理后，病毒造成的细胞病变效应被显著抑制。进一步检测细胞中病毒相关基因扩增情况显示，ESI-09处理之后，EPC细胞中病毒相关基因(包括g，l，m，n，p)的表达被显著抑制，SVCV在转录及蛋白表达水平均被清除，同时细胞系中抗病毒免疫相关基因(包括epcifn,epcisg15,epcvig1)表达量基本恢复正常水平。

本发明实施例中选取鱼类细胞系源于SVCV重要宿主，因此通过建立细胞感染病毒的疾病模型，以及对病毒相关基因表达的检测，可知ESI-09适用于SVCV的病毒防治。

ESI-09作为预防或治疗SVCV感染的药物，药物可以以注射剂或口服剂形式使用，具有给药剂量低，成分单一，抗病毒效果佳的优点。ESI-09的结构式如下：

附图说明

图1为ESI-09对SVCV感染细胞的影响。