[发明专利]靶向DHX38多肽构建及其抗肝细胞癌干细胞活性应用

说明书

本发明公开了靶向DHX38多肽的构建及其抗肝细胞癌的活性；其中，一种靶向DHX38多肽的构建的序列，其包括，靶向DHX38多肽，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1；一种靶向DHX38多肽的构建方法，其包括，合成并将靶向DHX38多肽的核酸序列与pcDNA3.1(+)真核表达载体在T4连接酶作用下连接，获得重组质粒；将所述重组质粒利用脂质体转染肝细胞癌细胞。本发明利用多种功能手段分析其对肝细胞癌恶性及干细胞性的拮抗作用。在细胞生物学层面证明了此靶向DHX38多肽具有抑制肝细胞癌干细胞性并增强顺铂介导的化疗杀伤活性的潜能。

技术领域

本发明涉及生物工程技术领域，涉及一种靶向DHX38多肽的构建及其抗肝细胞肝癌的活性，本发明具体是公开一种靶向DHX38多肽构建及其应用于肝细胞肝癌的靶向治疗。

背景技术

肝细胞肝癌(简称肝细胞癌)是主要的原发性肝癌类型，约占肝癌总发病数的90％。肝细胞癌是全球范围内主要的恶性肿瘤之一，死亡率在所有肿瘤中居第三位。肝细胞癌在我国尤为高发，发病率在所有肿瘤中居第5位，而死亡率高居第二位。肝细胞癌目前治疗依然主要以手术治疗结合化疗和放疗为主，多数晚期患者由于缺乏有效的治疗手段，预后极其不良。肝细胞癌的发生机制复杂，一些新型的治疗方式如靶向治疗对肝癌的临床价值依然不完全明确，限制了这些治疗的临床应用。因此，目前肝细胞癌急需新的肿瘤靶点治疗手段，以改善患者的临床预后。肝细胞癌的发生受多种因素的影响，其中肿瘤干细胞对肝细胞癌的进程发挥举足轻重的作用，因此，开发靶向肝细胞癌干细胞的靶向治疗手段对改善肝细胞癌的预后具有非常积极的意义。

在肝细胞癌发生过程中，肿瘤干细胞在肝癌的进程及治疗耐受中发挥关键作用。以往的文献表明，肿瘤干细胞主要分布于肝细胞癌侵袭的前沿，并是介导肿瘤转移、化疗耐受和免疫逃逸的关键细胞群体，如果无法从肝细胞癌组织中清除肿瘤干细胞，肿瘤将无法彻底清除，并在之后迅速复发，威胁患者生存。因此，靶向肝细胞癌干细胞是解决肿瘤转移、耐药和免疫逃逸的关键机制。我们近期通过研究发现一个与多种癌基因转录调控蛋白DHX38在肝细胞癌干细胞维持中发挥关键作用。缺失DHX38可以显著降低多种癌相关基因的表达，包括OCT4、CD44和LGR5等，从而抑制肝细胞癌干细胞的形成与增殖，并增强肝细胞癌对顺铂的敏感性。我们在此基础上设计出一段DHX38的靶向多肽序列，并发现此靶向DHX38多肽可以显著抑制DHX38的表达，进而抑制肝细胞癌的干细胞性及顺铂耐药，具有应用于肝细胞癌临床靶向治疗改善患者预后的潜在价值，具有良好的应用于肝细胞癌临床治疗的前景。

发明内容

作为本发明其中一个方面，本发明克服现有技术中存在的不足，提供靶向DHX38多肽的构建及其拮抗肝细胞癌干细胞性的价值。

本发明提供了如下技术方案：一种靶向DHX38多肽的构建序列，其cDNA序列和表达的多肽氨基酸序列：

编码cDNA序列：

GAAATTTGCT

GTGGCTGGCC

661 GAGTTGGGAC CAATGTTTTA TAGTGTGAAA CAAGCAGGTA AAAGCAGACA

GGAAAATCGC

721 AGACGGGCCA AGGAGGAGGC GAGCGCTATG GAAGAGGAGA TGGCACTGGC

CGAAGAGCAA

781 CTTAGGGCAC GGCGACAAGA ACAGGAAAAG CGGTCACCAC TCGGCTCTGT

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