[发明专利]一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记、其载体及其应用

说明书

本发明涉及转录组学技术领域，公开了一种调控系统性红斑狼疮(SLE)患者B淋巴细胞的分子标记、其载体及其应用。本发明筛选了一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记，所述分子标记为miRNA‑24550，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。将本发明的分子标记、引物、调节剂或载体在调控SLE患者B淋巴细胞生长中应用。本发明首次提出了miRNA‑24550在经Anti‑IgE活化的嗜碱性粒细胞源外泌体中显著高表达；经Anti‑IgE活化的嗜碱性粒细胞源外泌体miRNA‑24550可以促进SLE患者淋巴B细胞存活及增殖，为明确SLE的发病机制和临床上SLE的诊治提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及转录组学技术领域，具体涉及一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记、其载体及其应用。

背景技术

系统性红斑狼疮(SLE)是一种慢性自身免疫性疾病，以适应性免疫应答过激，自身反应性B细胞过度活化产生大量致病性自身抗体和细胞因子等，进而诱发多个器官、系统受损为特点。而以靶向B细胞的生物疗法是目前正在进行的临床试验的研究重点，且部分正处于临床试验阶段。其中以靶向干预B细胞过度活化为中心，包括干预B细胞表面共刺激分子和活化因子，干扰B细胞内信号转导，甚至清除B细胞等途径有望成为防治SLE的新兴疗法。B细胞活化受多种因素的调控，如免疫调节机制缺陷、免疫耐受丧失、信号转导异常等。

嗜碱性粒细胞(Basoophilic granulocyte，basophil)作为固有免疫和适应性免疫相连接的“桥梁”方面的研究，近年引起了极大的关注。在MRL/lpr小鼠体内实验发现外周血嗜碱性粒细胞活化主要是IgE型循环免疫复合物介导，随即归巢至次级淋巴器官(脾脏和淋巴结)，通过多种途径调控B细胞，从而加剧SLE进展，而清除嗜碱性粒细胞可显著降低自身抗体水平，延缓SLE进展。

miRNA是一类由内源基因编码的长度约为20～24个核苷酸的非编码单链RNA分子。近年来，miRNA的研究主要集中于其转录后水平基因表达调控的机制，miRNA可通过碱基互补的原理结合mRNA的3'端非编码区(3'untranslatedregions，3'UTR)，随即降解mRNA或抑制mRNA的翻译，从而调控基因的表达。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处而提供一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记、其载体及其应用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

第一方面，本发明筛选了一种调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记，所述分子标记为miRNA-24550，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。miRNA-24550可以促进SLE患者淋巴B细胞存活及增殖。

第二方面，本发明提供了一种所述调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记的引物，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

第三方面，本发明提供了一种SLE患者B淋巴细胞的调节剂，所述调节剂包括miR-24550mimic。

第四方面，本发明提供了一种调控SLE患者B淋巴细胞的载体，所述载体装载有权利要求1所述调控SLE患者B淋巴细胞的分子标记。

作为本发明所述调控SLE患者B淋巴细胞的载体的优选实施方式，所述载体为经Anti-IgE活化的嗜碱性粒细胞源外泌体。

外泌体作为一种细胞间通讯载体，可包裹miRNA释放至胞外，减少miRNA的降解，将miRNA转运至受体细胞内，进而调控受体细胞功能；经Anti-IgE活化的嗜碱性粒细胞可通过外泌体调节B细胞功能，可促进SLE患者B细胞分化。

优选的，所述外泌体的制备方法包括以下步骤：

(1)取外周血嗜碱性粒细胞，经Anti-IgE刺激活化后培养；离心取细胞培液上清；

(2)超速离心，即得。