[发明专利]一种猕猴桃来源的植物纳米囊泡及其应用

权利要求书

1.一种猕猴桃来源的植物纳米囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将猕猴桃通过低速螺旋挤压榨出原浆；

（2）将（1）中所得原浆通过筛网过滤除杂，收集滤液；

（3）将（2）中得到的滤液依次进行低速、中速、高速和超速离心，每次离心后弃去沉淀，收集上清液进行下一次离心，其中最后一次离心，收集沉淀；所述低速离心的离心力为100~800×g，离心时间为5~10分钟；所述中速离心的离心力为1000~8000×g，离心时间为10~30分钟；所述高速离心的离心力为8000~12000×g，离心时间为30~60分钟；所述超速离心的离心力为100000~200000×g，离心时间为60~120分钟；

（4）将（3）中所述最后一次离心收集的沉淀用缓冲液重悬后超速离心，收集沉淀；所述沉淀用缓冲液再次重悬后高速离心，收集上清液；所述上清液通过滤膜即得猕猴桃来源的植物纳米囊泡；所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，所述缓冲液的pH范围为pH7.2~7.4；所述超速离心的离心力为100000~200000×g，离心时间为60~120分钟；所述高速离心的离心力为8000~12000×g，离心时间为30~60分钟；所述滤膜的孔径为0.45μm。

2.根据权利要求1所述的猕猴桃来源的植物纳米囊泡的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述低速螺旋挤压的转速为30～60转/分钟。

3.根据权利要求1所述的猕猴桃来源的植物纳米囊泡的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述筛网为200~2000目。

4.根据权利要求1所述的猕猴桃来源的植物纳米囊泡的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述低速离心的离心力为200~500×g；所述中速离心的离心力为2000~5000×g；所述高速离心的离心力为10000~12000×g；所述超速离心的离心力为100000~120000×g。

5.一种纳米囊泡RNA纳米颗粒复合物，其特征在于，由权利要求1所述的制备方法制得的猕猴桃来源的植物纳米囊泡作为载体，包裹siRNA，并与EGFR适配体复合形成EGFR_apt-KEVs-siRNA。

6.权利要求5所述的纳米囊泡RNA纳米颗粒复合物在制备抗非小细胞肺癌药物中的应用。