[发明专利]兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法有效
| 申请号: | 202210667578.7 | 申请日: | 2022-06-13 |
| 公开(公告)号: | CN115137872B | 公开(公告)日: | 2023-01-24 |
| 发明(设计)人: | 温永强;周莉平 | 申请(专利权)人: | 北京科技大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;A61L26/00 |
| 代理公司: | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人: | 岳野 |
| 地址: | 100083*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 兼具 抗菌 募集 间充质 干细胞 多肽 dna 凝胶 制备 方法 | ||
1.一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)将马来酸酐修改的多肽E7和5’端修饰巯基的DNA链段C进行迈克加成反应,制备得到E7-DNA链段C;其中,DNA链段C的碱基序列如序列表中SEQ ID NO:1所示;多肽E7的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示;
(2)在氮气的保护下,将所述E7-DNA链段C与DNA链段A和DNA链段B均匀混合,原位掺杂加入一定量的肝细胞生长因子HGF,通过动态交联形成致密的氢键进而获得负载HGF、兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶;其中,DNA链段A的碱基序列如序列表中SEQ IDNO:3所示;DNA链段B的碱基序列如序列表中SEQ ID NO:4所示。
2.根据权利要求1所述一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,步骤(1)具体为:
将马来酸酐修改的多肽E7水溶液与5’端修饰巯基的DNA链段C水溶液分别溶解后,加入到饱和NaHCO3溶液中在室温条件下反应10-18h;通过高效液相提纯产物,得到E7-DNA链段C。
3.根据权利要求2所述一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,反应体系溶液中多肽E7水溶液、DNA链段C水溶液、饱和NaHCO3溶液的体积比为(1~4):(0.5~2):(1~4);其中,多肽E7水溶液浓度为0.1~6.0 mM、DNA链段C水溶液的浓度为0.2~12 mM。
4.根据权利要求1所述一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,以物质的量计,E7-DNA链段C、DNA链段A和DNA链段B的比例为:(1~1.8):(1~2):(1~2.4)。
5.根据权利要求1所述一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,HGF的添加浓度为10-100ng mL-1。
6.根据权利要求1所述一种兼具抗菌和募集间充质干细胞的多肽DNA水凝胶的制备方法,其特征在于,将5 mM E7-DNA链段C,5 mM DNA链段A和5 mM DNA链段B均匀充分混合,HGF的添加浓度为95 ng mL-1。
7.一种采用权利要求1-6任一项所述方法制备的多肽DNA水凝胶的应用,其特征在于,将所述多肽DNA水凝胶应用于制备皮肤伤口修复材料以及用于制备神经系统疾病、骨科系统疾病、免疫系统疾病和循环系统疾病治疗材料。
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