[发明专利]一种间充质干细胞的提取物外泌体及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及化妆品技术领域，且公开了一种间充质干细胞的提取物外泌体的制备方法，将间充质干细胞在无血清培养基中进行细胞培养，将得到的培养传代间充质干细胞的培养基上清液和传代间充质干细胞超声破碎，溶于生理盐水后，得到间充质干细胞的提取物外泌体，间充质干细胞被认为是产生外泌体最强的细胞，其提取物外泌体具有干细胞的特点，能够促进组织修复，同时调节免疫功能，具有很好的抗衰老效果，作为化妆品原料使用时，能够起到促进人体肌肤再生，提高肌肤的含水量、改善肌肤松弛，提高肌肤的抗衰老功效，同时还能够修复肌肤损坏屏障，配合其它如精华乳、面霜、眼霜等使用，具有使用方便、见效快的特点。

技术领域

本发明涉及化妆品技术领域，具体为一种间充质干细胞的提取物外泌体及其制备方法和应用。

背景技术

间充质干细胞是一种多功能干细胞，主要存在于脂肪、骨髓、胎盘和脐带中，免疫原性低，具有优良的自我更新和多向分化增殖能力，能够分化成不同的体细胞代替受损的机体细胞，同时具有很强的细胞因子分泌功能，能够通过分泌机制来分泌多种细胞因子作用于其他细胞来发挥作用，促进皮肤组织分化、血管新生等，其中间充质干细胞提取物包括细胞分泌的小囊泡，是一种脂质双分子囊泡，能够携带细胞特异表达蛋白等物质，具有很好的催化活性，能够参与细胞各项生理功能。

间充质干细胞的提取物外泌体与间充质干细胞相比，具有体积小、复杂性低且更容易生产和存储的优点，可以通过其内容的蛋白、RNA成分胞间转移来实现和间充质干细胞类似的功效，进行组织修复、调节免疫功能等作用，在现有技术中，间充质干细胞的提取物外泌体可用于心血管疾病、血液系统疾病、骨损伤修复等领域，而间充质干细胞的提取物外泌体作为化妆品原料的报道和研究较少，且成本较高，将其应用在化妆品领域中，具有优良的皮肤修复功效，能够显著提高皮肤抗衰老的活性，给需要修复和衰老的皮肤提供了一种新方法。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种间充质干细胞的提取物外泌体及其制备方法和应用，解决了获得高活性间充质干细胞的提取物外泌体困难的问题，同时将间充质干细胞的提取物外泌体应用到化妆品领域，得到了一种能够提高肌肤弹性、紧致肌肤的抗衰老活性好的化妆品。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种间充质干细胞的提取物外泌体的制备方法，包括以下步骤制备而成：

步骤(1)将间充质干细胞在无血清培养基中进行细胞培养，培养过程中，进行传代培养，得到传代间充质干细胞；

步骤(2)获取步骤(1)中培养传代间充质干细胞的培养基上清液，同时将步骤(1)中获取的传代间充质干细胞超声破碎，再进行离心处理，过滤，将处理后传代间充质干细胞和培养基上清液混合，得到间充质干细胞的提取物外泌体粗产物；

步骤(3)将得到的间充质干细胞的提取物外泌体粗产物溶于生理盐水，使用生理盐水调节搅拌混合后，得到间充质干细胞的提取物外泌体。

优选的，所述步骤(1)中间充质干细胞来源包括人或动物的胎盘、脐带、脂肪、牙髓中一种或几种。

优选的，所述步骤(1)中传代培养中培养的温度为36-38℃。

优选的，所述步骤(1)中培养过程中细胞待到细胞生长达80-95％时可进行传代培养。

优选的，所述步骤(1)中传代间充质干细胞为第5-12代传代间充质干细胞。

优选的，所述步骤(2)中离心处理的速度为1000-1500rpm，离心处理的时间为20-40min。

优选的，所述步骤(3)中按照1×10⁸的细胞数量加入80-120ml的生理盐水。

优选的，所述间充质干细胞的提取物外泌体由所述的制备方法制备得到。

优选的，所述间充质干细胞的提取物外泌体在制备化妆品中的应用。