[发明专利]一种检测BCR-ABL1融合基因亚型P190型的引物组及试剂盒

说明书

本发明公开了一种检测BCR‑ABL1融合基因亚型P190型的引物组及试剂盒。所述引物组包括一对引物和一条探针，探针采用锁核酸标记后进行PCR扩增后收集荧光信号，可明显提高检测的灵敏度和特异性；本发明的检测引物组可以实现每10supgt;6/supgt;个有核细胞中检出一个含BCR‑ABL1融合基因亚型P190型的白血病细胞，且1小时内即可得到检测结果，从而满足白血病早期诊断、早期治疗的要求。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，更具体地，涉及一种检测慢性髓性白血病和急性髓性白血病BCR-ABL1融合基因亚型P190型的引物组及试剂盒。

背景技术

慢性髓性白血病(Chronic myelogenous leukemia，CML)是骨髓造血干细胞克隆性增殖形成的恶性肿瘤，绝大多数患者缓慢起病，早期常无症状，临床逐步出现乏力、食欲不振、腹部胀满、盗汗和体重降低，偶因体检发现白细胞计数增高或左上腹包块而作进一步检查。Ph染色体或bcr/abl融合基因为诊断必备条件。急性髓细胞性白血病(acutemyelogenous leukemia，AML)是髓系造血干/祖细胞恶性疾病。以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征，临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等，多数病例病情急重，预后凶险，如不及时治疗常可危及生命。本病占小儿白血病的30％。目前主要根据细胞形态学、免疫分型和遗传特征对急慢性髓性白血病进行综合诊断。

随着分子生物学技术的发展及对白血病分子遗传学的深入研究，已知白血病中存在着染色体结构畸变，包括缺失、重复、倒位、易位等，涉及至少数十种融合基因，融合基因形成是白血病的发生和发展的重要机制，对相关融合基因检测，可以达到精准诊断的目的，同时融合基因的定性和定量分析还可以作为预后评估的有效手段，在形态学完全缓解的基础上，使诊断更加准确。

BCR-ABL1融合基因是t(9；22)(q34；q11)易位(Ph染色体)导致，是由位于22q11.21的BCR基因和位于9q34.1的ABL1基因分别断裂并融合形成。根据BCR基因的断裂位点不同，可分为m-BCR(P190)、M-BCR(P210)和u-BCR(P230)三种，正确诊断这三种亚型对后续临床治疗判定预后具有重要的指导作用。在90％～95％的慢性髓性白血病患者中可检测到BCR-ABL1(P190和P210型)融合基因，该融合基因同时也是急性髓性白血病的检测指标之一。