[发明专利]一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体、制备方法及其应用在审
| 申请号： | 202210639966.4 | 申请日： | 2022-06-08 |
| 公开（公告）号： | CN115073594A | 公开（公告）日： | 2022-09-20 |
| 发明（设计）人： | 胡佳;周清华;许峰;阴丽媛;梁好 | 申请（专利权）人： | 四川大学华西医院 |
| 主分类号： | C07K16/10 | 分类号： | C07K16/10;C12N15/79;A61K39/42;A61P31/14 |
| 代理公司： | 成都科海专利事务有限责任公司 51202 | 代理人： | 刘宁 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 抗新冠 病毒 sars cov 突变 表面 s2 蛋白 抗体 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体为HXLC-031。
2.根据权利要求1所述的抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体HXLC-031的基因序列包括重链序列和轻链序列，其中，所述重链序列包括序列为SEQ ID NO.1的重链CDR1序列、序列为SEQ ID NO.2的重链CDR2序列和序列为SEQ ID NO.3的重链CDR3序列，所述轻链序列包括序列为SEQ ID NO.4的轻链CDR1序列、序列为SEQ ID NO.5的轻链CDR2序列和序列为SEQ ID NO.6的轻链CDR3序列。
3.根据权利要求2所述的抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体HXLC-031的重链序列具有与SEQ ID NO.7所示序列至少70％相同的基因序列，所述单链抗体HXLC-031的轻链序列具有与SEQ ID NO.8所示序列至少70％相同的基因序列。
4.根据权利要求1所述的抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体，其特征在于，所述单链抗体HXLC-031具有对SARS-CoV-2原始株、Beta突变株、Delta突变株以及Omicron突变株均大于90％的中和活性。
5.一种抗体偶联物，其特征在于，所述抗体偶联物包括抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体和偶联蛋白或偶联药物。
6.一种抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体的制备方法，其特征在于，包括：
(1)根据新冠肺炎康复者的外周血分离出的B细胞构建全人源噬菌体单链抗体展示库；
(2)以新冠病毒SARS-CoV-2表面S2蛋白结构域为固定相，以全人源噬菌体单链抗体展示库为流动相，经过一段时间孵育后，洗去未结合靶蛋白的噬菌体，并用酸洗脱下与靶蛋白结合的噬菌体，洗脱下来的噬菌体经感染宿主细胞繁殖扩增后，再进行下一轮的筛选，重复吸附-洗脱-扩增的过程3次；以筛选阳性克隆并测序；
(3)将经过筛选得到的单克隆进行后续的ELISA鉴定，选择OD值大于1.8的克隆进行测序，得到抗S2 scFv序列；
(4)将所得到的单链抗体序列克隆至真核表达载体pcDNA3.4里；
(5)抗体表达纯化。
7.权利要求1至4所述的抗新冠病毒SARS-CoV-2突变株表面S2蛋白的单链抗体在制备治疗或预防SARS-CoV-2突变病毒感染性疾病的药品中的用途。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述药品包括抗体。
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