[发明专利]RPN11标记物在检测骨髓瘤及其患病风险、预后分析及治疗药物中的应用

说明书

本发明公开了RPN11标记物在检测骨髓瘤及其患病风险、分子分型、预后分析及治疗药物中的应用，包括：一种用于检测焖燃型骨髓瘤及多发性骨髓瘤及其患病风险、多发性骨髓瘤患者的分子分型、多发性骨髓瘤患者的预后分析、预测多发性骨髓瘤患者对硼替佐米治疗反应性的检测试剂及试剂盒，以及一种用于治疗耐药t(4；14)易位多发性骨髓瘤的药物组合物。特别是将RPN11和组蛋白甲基转移酶MMSET组合使用，使得检测性能更灵敏、更准确，避免了患者存在基因型与病情发展预判不匹配的情况，能够有效预测t(4；14)易位的MM患者总生存期和预后情况。并且，药物组合物具有协同作用，有效促进t(4；14)易位多发性骨髓瘤细胞凋亡。

技术领域

本发明属于多发性骨髓瘤的诊疗领域，特别涉及RPN11标记物在检测骨髓瘤及其患病风险、分子分型、预后分析及治疗药物中的应用。

背景技术

多发性骨髓瘤(MM)是仅次于淋巴瘤的第二大血液系统恶性肿瘤，其主要临床特征为血液中的浆细胞在骨髓内克隆性恶性增生性疾病，约占血液系统恶性肿瘤的10％。2021年美国癌症协会发表的《2020年癌症数据报告》显示：MM的年新发病例为176404例，占所有新发肿瘤病例的0.9％；年新发死亡病例为117077例，占所有新发死亡肿瘤病例的1.2％。MM在我国目前发病率也呈现逐年上升的趋势，并且与欧美国家相比，我国的中位发病年龄明显早于西方国家。目前模型认为，MM从临床意义不明的单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)发展为焖燃型骨髓瘤(SMM)，最后发展为有症状的多发性骨髓瘤(MM)，最终发展为浆细胞白血病(PML)。

多发性骨髓瘤是一种具有高度异质性的恶性浆细胞疾病，在过去的几年里，随着新药的出现患者的生存已得到极大的改善，但在分子分型及预后评估方面仍面临挑战。现有研究表明，几乎所有MM病例都有细胞遗传学的异常，表现为IgH基因的增强子易位形成融合基因、超二倍体和亚二倍体核型，以位于14号染色体的IgH基因增强子发生易位为主。IgH基因增强子可与不同染色体发生易位融合，其中t(4；14)属于高危基因型，患者约占15％-20％。t(4；14)是4号染色体基因FGFR/MMSET与IgH基因的增强子融合，在此类患者中，组蛋白甲基转移酶MMSET均会出现异常高表达。目前MM患者的治疗方案及预后评估主要依赖于IgH基因增强子易位的基因分型来确定，但约20％的患者存在基因型与病情发展预判不匹配的情况，目前缺乏一类能够有效预测t(4；14)易位的MM患者总生存期和预后的标志物，同时也缺少一种独立于IgH基因增强子易位，能够有效提示预后和治疗方案的分子分型方案。

同时，近年来，以硼替唑咪为代表的针对20S蛋白酶体的抑制剂显著改善了MM患者的总体生存率。然而，在治疗过程中，蛋白酶体抑制剂药物仍会引起血小板减少、胃肠疾病和周围神经病变等严重副作用，克服硼替唑咪治疗的毒性和耐药性是MM患者治疗方面的难题，特别是对于t(4；14)易位多发性骨髓瘤的患者，且目前也尚缺乏能够有效预测MM患者对硼替唑咪治疗反应性的标志物。

发明内容

本发明的目的在于为检测焖燃型骨髓瘤及多发性骨髓瘤及其患病风险、多发性骨髓瘤患者的分子分型、多发性骨髓(尤其是伴有t(4；14)易位)瘤患者的预后分析、预测多发性骨髓瘤患者对硼替佐米治疗反应性提供检测试剂和试剂盒，且为t(4；14)易位多发性骨髓瘤的治疗提供新的药物组合。本发明的“RPN11”是指包含Gene ID No.10213所对应的核苷酸序列及相应编码序列NP_005796.1所示的蛋白，以及在原核及真核系统中纯化得到的蛋白。RPN11核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示和编码蛋白序列如SEQ ID NO:2所示。

为了实现本发明目的本发明在研究过程中提供了RPN11基因及其编码蛋白在多发性骨髓瘤中对肿瘤细胞(伴有t(4；14)易位)存活、增殖的影响，主要包括：

1)提供了原核系统体外纯化的RPN11蛋白。

2)提供了RPN11基因的shRNA序列。