[发明专利]修饰NF-YC4启动子的转录抑制子结合位点以增加蛋白质含量和抗应力

权利要求书

1.一种在包含NF-YC4基因的植物细胞中增加蛋白质含量的方法，所述NF-YC4基因包含启动子，所述启动子包含转录抑制子结合位点，所述方法包括修饰所述转录抑制子结合位点，从而转录抑制子不能阻碍NF-YC4基因转录，从而所述植物细胞中的蛋白质含量增加。

2.如权利要求1所述的方法，其进一步包括从所述植物细胞生成植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述植物细胞是植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物的部分。

4.一种产生蛋白质含量增加的植物的方法，所述方法包括将生物体与第二植物杂交以产生后代植物和选择蛋白质含量增加的后代植物，从而产生蛋白质含量增加的植物，其中所述生物体是根据权利要求2或3的方法获得的植物。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述转录抑制子结合位点包含ERF基序、RAV 1基序或ERF基序和RAV 1基序两者。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述植物细胞是水稻细胞并且(i)缺失2个ERF基序，(ii)缺失RAV 1基序，或(iii)缺失RAV 1基序和ERF基序。

7.如权利要求5所述的方法，其中所述植物细胞是大豆细胞并且(i)缺失2个RAV 1基序或(ii)缺失RAV 1基序和ERF基序。

8.如权利要求5所述的方法，其中用TALENS缺失ERF基序、RAV 1基序或ERF基序和RAV 1基序两者。

9.如权利要求5所述的方法，其中用CRISPR/Cas9缺失ERF基序、RAV 1基序或ERF基序和RAV 1基序两者。

10.如权利要求4所述的方法，其中所述方法进一步包括将选择的后代植物与所述第二植物杂交以产生回交后代植物，选择蛋白质含量增加的第一回交后代植物以产生选择的回交后代植物，和重复3次或更多次杂交和选择以产生蛋白质含量增加的回交后代植物。

11.一种产生植物细胞、植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物的方法，包括修饰其中的NF-YC4基因的启动子中转录抑制子结合位点，使得转录抑制子不能阻碍NF-YC4转录，其中与相应的植物细胞、植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物相比，所述植物细胞、植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物具有增加的蛋白质含量，在所述相应的植物细胞、植物细胞集合、植物组织、植物器官或植物中，NF-YC4基因包含启动子，所述启动子包含未经修饰的转录抑制子结合位点。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述植物是杂交种植物。

13.如权利要求11所述的方法，其进一步包括从所述植物或权利要求12定义的杂交种获得种子。

14.一种在包含NF-YC4基因的植物细胞或植物中提高对病原体或害虫抗性的方法，所述NF-YC4基因包含启动子，所述启动子包含转录抑制子结合位点，所述方法包括在有感染病原体或害虫的风险的植物细胞或植物中修饰NF-YC4基因的启动子中的转录抑制子结合位点，使得转录抑制子不能阻碍NF-YC4基因转录，从而在所述植物细胞或植物中提高对病原体或害虫的抗性。

15.如权利要求14所述的方法，其进一步包括从所述植物细胞再生植物。

16.如权利要求14所述的方法，其中所述方法进一步包括将包含编码Qua-QuineStarch(QQS)多肽的核苷酸序列的多核苷酸引入所述植物细胞或植物并在其中表达，所述多肽具有SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列，其中所述核苷酸序列与启动子可操作连接。