[发明专利]一种高纯度地骨皮乙素的制备方法

说明书

本发明涉及一种高纯度地骨皮乙素的制备方法及应用，属于中草药提取分离领域。该方法的具体步骤为：将枸杞或宁夏枸杞植物粗粉碎后，水或低醇提取，提取液依次进行大孔吸附树脂、凝胶和反相材料柱层析，以乙醇/甲醇、水、酸溶液为洗脱剂，洗脱液经TLC、HPLC分析检测后合并溶剂，溶剂回收，干燥，即得高纯度地骨皮乙素。本发明具有操作步骤易于重复、条件易于控制、放大和溶剂易回收、可反复使用，对环境污染较小，所得最终产物基本不含有机溶剂残留，纯度达到95%以上。

技术领域

本发明涉及一种从枸杞或宁夏枸杞植物中提取、制备高纯度地骨皮乙素的方法。

背景技术

枸杞或宁夏枸杞为枸杞属植物，全世界约80种，主要分布在南美洲，少数种类分布于亚欧大陆温带，我国产7种3变种，主要分布于北部。地骨皮是我国常用的传统中药，被历年版中国药典收载，《中国药典》2020版收载地骨皮为茄科植物枸杞Lycium chinenseMill.或宁夏枸杞Lycum barbarum L.的干燥根皮。春初或秋后采挖根部，洗净，剥取根皮，晒干。地骨皮性甘、寒，归肺、肝、肾经。功效：凉血除蒸，清肺降火，用于阴虚潮热，骨蒸盗汗，肺热咳嗽，咯血，衄血，内热消渴。现代研究表明地骨皮具有降血压、降血脂、降血糖、抑菌抗炎、免疫调节、解热镇痛等药理活性。

枸杞植物中主要含有生物碱，目前已报道的近100个，根据结构类型主要分为酰胺类、环肽类、哌啶类、莨菪烷型、去甲基莨菪烷型、环戊烷并吡咯烷型等生物碱，酰胺类中地骨皮乙素占大部分。地骨皮乙素具有较强的药理和生理活性，具有降压、降糖、抗肿瘤、抗菌、神经元保护和修复、抗氧化、治疗脓毒症等功效。近年来，许多学者对地骨皮乙素的药理活性和临床应用进行深入而广泛的研究，为地骨皮乙素的综合开发和利用开辟更广阔的前景，但由于制备条件的限制，影响了地骨皮乙素的综合开发和利用。

地骨皮乙素为粉末，溶于甲醇、乙醇、水等溶剂，极易吸潮为油状，是地骨皮中主要有效成分之一，也是地骨皮药材和含地骨皮药材制剂质量控制的有效成分之一(香港中药材标准)，具有较好的降压、抗肿瘤、降糖、神经元保护和修复、治疗脓毒症和具有PD-1/PD-L1抑制等功效。

文献检索，地骨皮乙素主要从地骨皮药材化中分离得到。Funayama S，等人(Kukoamine B，a spermine alkaloid from Lycium chinense[J].Phytochemistry，1995，38(6)∶1529-1564.)、赵庆春等人(地骨皮醇提物、地骨皮甲素及乙素具有神经保护作用的药物中的用途[P]，中国专利，CN103735728，2016，08.)、郑江等人(苦柯胺A和苦柯胺B的用途[P].中国专利， CN101829075，2010，09.)、张汉扬等人(苦柯胺分离方法[P]，中国专利，CN104418761A， 2015，03.)、张金芳等人(一种地骨皮乙素的制备方法[P]，中国专利，CN103435512，2013， 12.)，主要采用甲醇、乙醇或酸水等溶剂提取，正丁醇萃取富集，并进行离子交换树脂柱、聚酰胺柱、硅胶柱、反相材料柱层析或通过半制备液相、高速逆流等方法，以氯仿、甲醇或乙腈等溶剂为洗脱剂，进行实验室级别样品的制备，存在纯度低，回收率低，能耗大，无法进行规模化制备，且易存在有机溶剂残留，对环境污染严重等缺点。

发明内容

本发明在于提供一种从富含地骨皮乙素(地骨皮乙素含量大于0.01％)的枸杞或宁夏枸杞植物中提取制备地骨皮乙素的方法及应用。采用本发明制备地骨皮乙素，工艺简便可行，适用于工业化大生产，毒性小，且所用溶剂易回收、可反复使用，对环境污染较小，所得最终产物基本不含有机溶剂残留。

本发明涉及一种从富含地骨皮乙素的枸杞和/或宁夏枸杞植物中提取制备高纯度地骨皮乙素的方法及应用：

1.一种高纯度地骨皮乙素的制备方法，其特征在于以下步骤：