[发明专利]检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用

说明书

本发明涉及检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用及其试剂盒，其中hsa_circ_0099132的序列如SEQ ID No.1所示。本发明首次发现hsa_circ_0099132在结直肠癌细胞中表达上调，其表达量在结肠癌和癌旁组织中的差异具有统计学意义，在人结直肠癌诊断中具有诊断效能。同时，本发明还发现hsa_circ_0099132的表达量与结直肠癌确诊患者的临床特征和病理特征无相关性。因此本发明将检测hsa_circ_0099132的试剂应用于制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中，制备得到的人结直肠癌辅助诊断试剂盒具有敏感性和特异性较高且个体差异较小的优点。

技术领域

本发明涉及生物医学检测技术领域，特别是涉及检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用及其试剂盒。

背景技术

结直肠癌是一种起源于结肠或直肠的恶性肿瘤疾病，是威胁人类生命健康的常见恶性肿瘤之一，且其发病率和死亡率均居高不下。结直肠癌目前的检测手段主要有组织活检、影像学检查和血清生物标记物水平的检测，但是组织活检和影像学检查的准确性和敏感性有限，而常用的血清生物标记物如CEA、CA12-5、CA19-9等的特异性较差、个体差异较大，因此需要寻找对结直肠癌敏感性和特异性较高的生物标志物。

环状RNA(CircRNA)在1976年首次被发现，是一类特殊的非编码RNA分子，其与线性RNA的最大不同在于结构呈缺乏自由末端的闭环状，因此与其他类型的RNA相比，环状RNA对核酸外切酶和RNA酶具有一定抵抗力，使之更稳定，进化上更保守。而目前对环状RNA的研究显示，其通过与miRNA结合的海绵作用以及与RNA结合蛋白的相互作用等参与癌症的发展机制。因此，环状RNA在成为癌症生物标志物方面具有巨大的潜力。

发明内容

基于此，本发明的目的在于提供一种检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用以及其试剂盒，其具有敏感性和特异性较高且个体差异较小的优点。

检测hsa_circ_0099132的试剂在制备人结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用，其特征在于，所述hsa_circ_0099132的序列为SEQ ID No.1所示。

本发明所述的hsa_circ_0099132是一种环状RNA，其由两个外显子组成，拼接长度为535bp，其母基因为RAB3IP，在基因组上的定位为chr12:70149163-70150443。本发明通过研究首次发现hsa_circ_0099132在结直肠癌组织中高表达，且其表达量在结直肠癌组织和癌旁组织中具有显著差异，其表达水平与患者的临床特征无相关性。因此，所述的检测hsa_circ_0099132的试剂在结直肠癌辅助诊断试剂盒中的应用具有敏感性和特异性较高且个体差异小的优点。

进一步地，所述检测hsa_circ_0099132的试剂包括实时荧光定量检测hsa_circ_0099132表达量的引物。

进一步地，所述检测hsa_circ_0099132表达量的引物的上游引物序列如SEQ IDNo.2所示，所述引物的下游引物序列如SEQ ID No.3所示。

本发明还提供一种人结直肠癌辅助诊断试剂盒，其包括检测hsa_circ_0099132的试剂。

进一步地，所述检测hsa_circ_0099132的试剂包括实时荧光定量检测hsa_circ_0099132表达量的引物。

进一步地，所述检测hsa_circ_0099132表达量的引物的上游引物序列如SEQ IDNo.2所示，所述引物的下游引物序列如SEQ ID No.3所示。

进一步地，所述试剂盒还包括特异性检测内参基因表达量的检测试剂。

进一步地，所述特异性检测内参基因表达量的检测试剂为检测GAPDH表达量的试剂。