[发明专利]一种基于MIRA技术快速鉴别肉制品中鸡源性成分的方法

说明书

本发明提供了一种基于MIRA技术快速鉴别肉制品中鸡源性成分的方法，属于食品安全生物技术领域。本发明首先提供了一种鉴别肉制品中鸡源性成分的引物探针组合，它包括正向引物、反向引物和探针；所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；所述反向引物的核苷酸序列如SEQ IDNO.13所示；所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。本发明还提供了含该引物探针组合的试剂盒以及具体鉴别方法。本发明鉴别肉制品中鸡源性成分的检测方法条件温和、操作简便、特异性强、灵敏度高、可靠性好，结果可视化，十分利于现场检测。本发明检测方法为现场快速、简捷、灵敏的检测肉制品鸡源性成分提供一种新的选择，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于食品安全生物技术领域，具体涉及一种基于MIRA技术快速鉴别肉制品中鸡源性成分的方法。

背景技术

随着市场全球化及贸易自由化的不断发展，消费者对肉制品产品质量和真实性越来越重视，肉制品安全提升到一个新的高度。近年来，国内外肉类掺假事件时有发生，引发社会广泛关注，对食品安全和食品贸易造成严重危害。肉类掺假的方式越来越多，形式越来越复杂。目前，肉制品的掺假主要表现为原料肉掺假、组织替换等，这些肉类真实性问题不但严重地侵害了消费者利益，更是给肉制品食用安全带来潜在危害，同时也可能带来宗教信仰和道德标准方面的风险。

因此，肉制品动物源性成分检测变得越来越重要，核酸检测可以从样品中检测出痕量目标分子，具有灵敏特异等诸多优势，已成为食品真实性研究中必要的技术手段，并在检测领域中得到广泛应用。但是，传统的核酸检测技术对实验室环境、仪器及人员要求较高，无法满足现场检测监管需求。

一些新型检测方法，如重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase PolymeraseAmplification，RPA)、多酶恒温快速扩增技术(Multienzyme Isothermal RapidAmplification，MIRA)等，由于不需要高温变性、退火等步骤，对精密仪器依赖程度大大降低，是实现现场即时检测的有效技术手段。同时结合侧向流层析技术(Lateral FlowDipstick，LFD)，不仅可以达到简捷、灵敏、特异的检测目的，而且能更好地为现场动物源成分检测提供可视化应用服务。但是这些方法的关键在于寻找到合适的引物，引物的选择会影响检测速度和灵敏度。目前，寻找到合适的引物是肉制品动物源性成分检测的难点。

寻找到一种合适的引物，提供一种新的肉制品中鸡源性成分检测方法，为现场快速、简捷、灵敏的检测肉制品中鸡源性成分提供一种新的选择，对于食品安全具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于MIRA技术快速鉴别肉制品中鸡源性成分的方法。

本发明提供了一种鉴别肉制品中鸡源性成分的引物探针组合，它包括正向引物、反向引物和探针；所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示；所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示。

本发明还提供了前述的引物探针组合在鉴别肉制品中鸡源性成分的用途。

进一步地，所述用途为在制备鉴别肉制品中鸡源性成分的试剂盒中的用途。

进一步地，所述鉴别肉制品中鸡源性成分的方法为多酶恒温快速扩增可视化技术。

进一步地，所述多酶恒温快速扩增可视化技术为多酶恒温快速扩增技术结合侧向流层析技术。

本发明还提供了一种鉴别肉制品中鸡源性成分的试剂盒，所述试剂盒包括前述的引物探针组合。

进一步地，所述鉴别肉制品中鸡源性成分的方法为多酶恒温快速扩增可视化技术。

进一步地，所述多酶恒温快速扩增可视化技术为多酶恒温快速扩增技术结合侧向流层析技术。