[发明专利]一种甲醛荧光探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种甲醛荧光探针，其特征在于，具有如式I所示的化学结构通式：

2.根据权利要求1所述的甲醛荧光探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、三苯基膦和3-溴丙胺氢溴酸盐在乙腈中加热回流，抽滤、干燥得到中间体M1；

S2、将S1得到的中间体M1和4-溴-1,8-萘二甲酸酐、三乙胺在甲醇中加热回流，减压蒸馏后进行层析得到中间体M2；

S3、将S2得到的中间体M2和水合肼在无水乙醇中加热回流，抽滤、干燥后进行层析得到荧光探针；

具体的合成合成路线如下：

3.根据权利要求2所述的甲醛荧光探针的制备方法，其特征在于，S1中，所述三苯基膦、3-溴丙胺氢溴酸盐和乙腈的质量体积比为1g：0.832g:10mL，加热回流的时间为10-18h。

4.根据权利要求2所述的甲醛荧光探针的制备方法，其特征在于，S2中，所述中间体M1、4-溴-1,8-萘二甲酸酐、三乙胺和甲醇的质量体积比为0.958g:0.554g:5mL:30mL，加热回流的时间为5-8h。

5.根据权利要求2的甲醛荧光探针的制备方法，其特征在于，S3中，所述中间体M2、水合肼和无水乙醇的质量体积比为2.64g:6mL:30mL，加热回流的时间为3-6h。

6.根据权利要求2的甲醛荧光探针的制备方法，其特征在于，S2和S3中，所述层析中固定相是硅胶，流动相是三氯甲烷和甲醇，S2中三氯甲烷和甲醇的体积比为5:1，S3中三氯甲烷和甲醇的体积比为10～30:1。

7.一种权利要求1所述的甲醛荧光探针在定量检测溶液或细胞中甲醛的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述检测的方法包括以下步骤：

(1)将荧光探针分别加入不同标准浓度的甲醛溶液，加入到PBS缓冲溶液进行稀释，使得混合溶液的总体积为2mL，混合溶液充分混匀后孵育10min，得到不同浓度甲醛混合测试溶液，荧光法测量发射波长在548nm的荧光值，通过荧光值与甲醛溶液浓度建立标准曲线；

(2)将待测的甲醛溶液按照步骤(1)的方法制备成待测溶液，测量荧光值，将荧光值带入标准曲线中，计算甲醛溶液的含量。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述甲醛溶液的线性范围为0～30μM，检测限为14.9nM。